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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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水飽和酚100mL售后服務(wù)

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更新時間:2017-06-28 11:04:46瀏覽次數(shù):601次

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水飽和酚100mL售后服務(wù)詳細(xì)介紹:

試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
 CAP1
粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3抗體      CSF3
細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體      CCR7
*氧化酶10抗體      COX10
CRTAM抗體      CRTAM
單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體      MCP4
NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體      KIR2DL3
CRX抗體      CRX1
CD8抗體      CD8
磷酸化原癌蛋白CBL2抗體      phospho-CBL2 (Tyr731)
磷酸化原癌蛋白CBL2抗體      phospho-CBL2 (Tyr774)
磷酸化周期素依賴激酶2抗體      Phospho-cdc2 (Thr14)
磷酸化周期素依賴激酶2抗體      Phospho-cdc2 (Tyr15)
細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體      Cdc25A
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體      Phospho-cdc25A (Thr506)
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體      Phospho-cdc25A (Ser76)
磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體      Phospho-cdc25A (Ser178)
半*蛋白酶8抗體      caspase-8 subunit p18
半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗體      caspase-9 p10
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體      CLEC5A
周期素依賴激酶1抗體      CDK1
細(xì)胞衰老抑制基因抗體      RSL1D1
環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體      CREB-1
酪蛋白激酶1γ1抗體      CSNK1G1
21號染色體開放閱讀框88抗體
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RNA 洗脫液50mL售后服務(wù)

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