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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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Southern 級(jí)真菌 DNAout10 次售后服務(wù)

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更新時(shí)間:2017-06-29 14:35:52瀏覽次數(shù):296次

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Southern 級(jí)真菌 DNAout10 次售后服務(wù)詳細(xì)介紹:

試劑的取用規(guī)則:
(1)試劑不能與手接觸。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
磷酸化鉀通道相互作用蛋白3抗體      phospho-CSEN (Ser63)
16號(hào)染色體開放閱讀框61抗體      C16orf61
視錐感光細(xì)胞環(huán)磷酸鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體      CNG3
環(huán)核苷酸門控陽離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體      CNGB3
非受體*激酶c-Abl抗體      c-Abl
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白152抗體      CCDC152
甘油二酯*磷酸轉(zhuǎn)移酶抗體      CHPT1
嗜鉻粒素B抗體      Chromogranin B
血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體      Cullin 5
細(xì)胞色素P450Ⅱj3抗體      Cyp2-j3
鈣激活氯離子通道4抗體      CLCA4
周期素依賴性激酶6抗體      CDK6
周期素依賴性激酶7抗體      CDK7
周期素依賴性激酶8抗體      CDK8
周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體      CDKN1C
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體      Chondrocalcin
c-fos抗體      c-fos
嗜鉻粒素A抗體      Chromogranin A
CGRP降鈣素基因相關(guān)肽抗體      CGRP
ChAT*乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體      ChAT
細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體      CNTD2
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體      Coronin 1a
抗菌肽/天蠶素抗體      Cecropin
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體      Camk1g
細(xì)胞表面趨化因子受體8抗體
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巰基磁珠 2mL售后服務(wù)

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