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A-704人腎癌細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

A-704人腎癌細(xì)胞
Human Kidney Cancer Cells
貨號(hào)：A704
價(jià)格：￥1350.0
規(guī)格： 1*10?6?
細(xì)胞介紹
A-704細(xì)胞系來(lái)源于78歲男性腎癌患者，D.J. Giard建系，該細(xì)胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主。細(xì)胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤，但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。

詳細(xì)介紹

A-704

人腎癌細(xì)胞

Human Kidney Cancer Cells

貨號(hào)：A704

價(jià)格：￥1350.0

規(guī)格： 1*10 6

細(xì)胞介紹
A-704細(xì)胞系來(lái)源于78歲男性腎癌患者，D.J. Giard建系，該細(xì)胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主。細(xì)胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤，但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。

細(xì)胞特性
1）來(lái)源：腎癌
2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3）含量：>1x106 個(gè)/mL
4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

A-704人腎癌細(xì)胞運(yùn)輸和保存：使用T25瓶充液發(fā)送活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，請(qǐng)先在顯微鏡下檢查細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過(guò)夜后，再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，可進(jìn)行細(xì)胞后續(xù)處理操作，按照以下方式進(jìn)行。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?/span>

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

A-704人腎癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM， GIBCO，貨號(hào)41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。