海南生化培養(yǎng)箱SPX-450微生物培養(yǎng)箱生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法的應用
1.多管發(fā)酵法
初發(fā)酵實驗 發(fā)酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,并在內倒置有小玻璃管。每個樣品用三個不同的水樣量接種,同一接種水樣量要有五管,將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中,在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。乳糖能起選擇作用,因為很多細菌不能發(fā)酵乳糖,而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產酸產氣。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,細菌產酸后,培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發(fā)酵管表明試驗陽性,如在倒管內產氣不明顯,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起為陽性。
復發(fā)酵實驗 輕微振蕩初發(fā)酵試驗陽性結果的發(fā)酵管,用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉接到EC培養(yǎng)液中,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來自自然環(huán)境的大腸菌群的生長)。培養(yǎng)后立即觀察,發(fā)酵管產氣則證實為糞大腸菌群陽性。
2.濾膜法
濾膜是一種微孔性濾膜,孔徑0.45μm。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過濾器中,經過抽濾,細菌即被截留在膜上,然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍色或藍綠色,其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無色。正常情況下,由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,在M-FC培養(yǎng)基上很少見到非糞大腸菌菌落。
二.兩種方法的注意事項
1.培養(yǎng)溫度的要求 總大腸菌群中的細菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的zui合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長,而直接來自糞便的大腸菌群細菌,習慣于37℃左右生長,如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此,可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分,兩種方法也都基于此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入 培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
2.加氯水樣的處理 經氯處理消毒過的水樣,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),在采集水樣時應提前在采樣瓶中加*,*可以脫氯,使受損的細菌得以復蘇與修復,從而避免出現計數結果偏低甚至假陰性的現象。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細菌其抑制作用尤為明顯,所以抽濾時應對水樣進行大量無菌水稀釋,以減少余氯的殘留。

3.樣品的保存 采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當可使樣品中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結果的準確性。檢測室接到水樣后,應立即檢測,如因故不能檢測時,應立即將樣品置于冰箱內(2℃-10℃)并于2小時內檢測。
4.培養(yǎng)物質的制備與保存
?、?多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注意:這個溫度也應控制好,既達到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質分解流失),然后貯存于冰箱或暗處備用。
⑵.濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍的純度和質量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩(wěn)定性。
海南生化培養(yǎng)箱SPX-450微生物培養(yǎng)箱主要特征:
1生化培養(yǎng)箱采用鏡面不銹鋼內膽,四角半圓弧易清潔,箱內擱板間可調。
2電腦智能控溫儀,具有設定、測定溫度雙數字顯示和PID自整功能,控溫精確、可靠。
3生化培養(yǎng)箱采用雙重六結構,隔熱性能好。采用全鋼化玻璃門,便于觀察箱內情況。
4模塊式制冷裝置,配置延時啟動,高、低壓力多重保護。
5生化培養(yǎng)箱采用*的不銹鋼循環(huán)風道,強迫空氣循環(huán),溫度均勻。
6設有大視角觀察窗、照明燈。

技術參數:
型號 | 容積( L) | 控溫范圍(℃) | 控溫精度(℃) | 外型尺寸mm(寬×深×高) |
SPX-450 | 450 | 0~50 | ±0.8 | 643×648×1850 |
SPX-600 | 600 | 1265×594×1525 |
SPX-1000 | 1000 | 1215×648×1850 |
SPX-1250 | 1250 | 1798×675×1830 |
SPX-1500 | 1500 | 1892×760×1830 |
SPX-2000 | 2000 | 2395×760×1880 |
