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上海李記生物科技有限公司


SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)

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產品型號C6244L0554

品       牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-11-28 14:47:28瀏覽次數:569次

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產品簡介

SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)可以標記活細胞中的線粒體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,屬線粒體選擇性染料,該染料能輕易進入活細胞內,通過線粒體膜電位變化滲透進入線粒體,并在線粒體中富集。

詳細介紹

SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)產品描述

線粒體(mitochondrion)是一種存在于大多數真核細胞中兩層膜結構的細胞器,是細胞中“能量工廠”(cellular power plants)",生產了細胞所需的大部分ATP,除了為細胞提供能量外,還涉及諸如細胞分化、細胞信息傳遞和細胞凋亡等過程,并擁有調控細胞生長細胞周期的能力。已有文獻報道,線粒體還與線粒體失調癥、心臟功能障礙、衰老等人類疾病有關。盡管大部分細胞遺傳物質DNA在細胞核內,但線粒體擁有獨立的基因組,呈現(xiàn)母性遺傳。基于以上特點,線粒體是生物、生命科技領域的研究熱點。

Smart Cell染色試劑盒Life-iLab公司專門研發(fā)的一類熒光成像工具,試劑盒設計嚴謹,人為手動操作的步驟很少。用來標記細胞器、亞細胞等結構,例如細胞膜、線粒體、線粒體和細胞核等。

Smart Cell線粒體染色試劑盒可以標記活細胞中的線粒體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,線粒選擇性染料該染料能輕易進入活細胞內,通過線粒體膜電位變化滲透進入線粒體,并在線粒體中富集。Smart Cell線粒體染色試劑盒提供了標記線粒體的全套試劑,能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇,既可單獨使用,也支持對細胞的多重熒光分析。這種高效的細胞標簽為從空間上和時間上研究發(fā)生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。

SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)試劑盒組分

組分

數量

Component A: MitoView Red染料 

100 µL (500 X DMSO stock solution)

Component B: 活細胞染色緩沖液 

50 mL

SmartCell 線粒體染色試劑盒Red(同Mitotracker Red)使用方法 

 1. 準備線粒體染色液

1.1 室溫避光放置5-10分鐘,預熱MitoView Red染料(Component A) 

1.2 20µL預熱好的MitoView Red染料(Component A),10 mL活細胞染色緩沖液(Component B)進行稀釋。 

注意:1) 20μL MitoView Red染料(Component A)足夠完成1塊96孔板實驗,剩余的MitoView Red染料(Component A) 可以根據需要分裝避光保存于-20℃,避免反復凍融。2)染料濃度根據具體應用會有不同,染色條件根據細胞類型、細胞或組織的染料滲透性不同可以進行調整優(yōu)化。

2. 細胞染色 

2.1 貼壁細胞:在96孔板(100μL)或培養(yǎng)皿內培養(yǎng)細胞,當細胞達到70-80%融合度,在96孔板或培養(yǎng)皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TRITC設置在顯微鏡下進行熒光觀察。

注意:如果細胞沒有充分染色,可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善

2.2 懸浮細胞1000 rpm 條件下離心細胞培養(yǎng)液5分鐘,棄去上清,用預熱好的細胞培養(yǎng)液溫和的重懸細胞,然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同Texas Red 設置在顯微鏡下進行熒光觀察。

 

1:HeLa 細胞用SmartCell線粒體染色試劑盒Red染色后進行成像分析

(所用96孔板為Costar black)

關鍵詞:顯微鏡

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