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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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血清鐵濃度測(cè)試盒（比色法）測(cè)定與注意事項(xiàng)
2023-11-20 閱讀(108)
血清鐵濃度測(cè)試盒（比色法）測(cè)定與注意事項(xiàng)：
一、測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍：提前取出標(biāo)準(zhǔn)液，置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管：取EP管，依次加入125 μL蒸餾水，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入125 μL標(biāo)準(zhǔn)液，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP管，依次加入125 μL血清，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
血清鐵濃度計(jì)算公式：
血清鐵含量(μmol /dL)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總
=10 × (A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液：100 μmol/L Fe3+標(biāo)準(zhǔn)液；V總：標(biāo)準(zhǔn)液總體積1mL；1 dL=0.1 L。
二、注意事項(xiàng)：
1、血清鐵含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑只能當(dāng)天使用。
3. 檢出限為1μmol/L。
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到520 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液解凍：提前取出標(biāo)準(zhǔn)液，置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管：取EP管，依次加入125 μL蒸餾水，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入125 μL標(biāo)準(zhǔn)液，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP管，依次加入125 μL血清，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來(lái)水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
血清鐵濃度計(jì)算公式：
血清鐵含量(μmol /dL)=[C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)]×V總
=10 × (A測(cè)定管－A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液：100 μmol/L Fe3+標(biāo)準(zhǔn)液；V總：標(biāo)準(zhǔn)液總體積1mL；1 dL=0.1 L。
注意事項(xiàng)：
1、血清鐵含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑只能當(dāng)天使用。
3. 檢出限為1μmol/L。
