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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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細(xì)胞活躍快樂(lè)實(shí)用方法小結(jié)
2024-5-20 閱讀(57)
細(xì)胞，生物學(xué)名詞，生物體的結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。一般具有細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。植物細(xì)胞的細(xì)胞膜外還有細(xì)胞壁。體形極微，在顯微鏡下始能窺見(jiàn)。形狀多種多樣，主要由細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成，表面有薄膜。動(dòng)植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)大致相同。植物細(xì)胞質(zhì)膜外有細(xì)胞壁，細(xì)胞壁中常有質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細(xì)胞中則無(wú)。細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)和繁殖等機(jī)能。細(xì)胞是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞心情不好，那么實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也不會(huì)好到哪兒去。讓細(xì)胞快樂(lè)下面就仔細(xì)了解一下吧。
1. 確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無(wú)菌
交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是最輕微的污染，也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌極易生長(zhǎng)，因此必須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前，應(yīng)用酒精擦拭干凈，以避免污染。
2. 在使用前正確解凍細(xì)胞
盡管解凍看起來(lái)是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟，但必須操作得當(dāng)，以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無(wú)法鋪板。因此，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋，以避免DMSO造成直接傷害。
3. 小心處理您的培養(yǎng)物
細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過(guò)。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動(dòng)可能會(huì)對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外，盡量避免一次處理多個(gè)細(xì)胞系，因?yàn)樗赡軙?huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析，以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。
4. 使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程共有3個(gè)階段：停滯期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期，分別代表了低細(xì)胞生長(zhǎng)、高細(xì)胞生長(zhǎng)和無(wú)細(xì)胞生長(zhǎng)。最有活力的細(xì)胞是健康的，快速分裂的，在對(duì)數(shù)期以70-80%的匯合度存在。
5. 在傳代之前不要讓細(xì)胞*匯合
匯合度是指貼壁細(xì)胞占據(jù)培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài)，因?yàn)樗馕吨?xì)胞不能繼續(xù)生長(zhǎng)。不過(guò)，當(dāng)務(wù)之急是使用活躍生長(zhǎng)的細(xì)胞。
6. 選擇最佳的培養(yǎng)基開(kāi)發(fā)策略
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基是控制產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和成本的最重要因素。必須針對(duì)每種培養(yǎng)物來(lái)定制培養(yǎng)基，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在決定以哪種方式來(lái)開(kāi)發(fā)您的培養(yǎng)基時(shí)，您有幾個(gè)選擇。您可以購(gòu)買現(xiàn)成的，自己開(kāi)發(fā)，也可以與另一家公司合作開(kāi)發(fā)特定的培養(yǎng)基。在這個(gè)過(guò)程中，您需要考慮時(shí)間和成本等因素。
