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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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抗原的要求與抗原效價(jià)的測(cè)定
2025-3-31 閱讀(16)
1、抗原的要求：
用于ELISA的抗原必須采用相當(dāng)純的抗原，如果含有其它雜質(zhì)，將與抗原共同競(jìng)爭(zhēng)固相載體上的有限位置。用于其它血清學(xué)反應(yīng)的抗原不一定能適用ELISA實(shí)驗(yàn)，必須經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，抗原必須能牢固地吸附于載體上，而不喪失其免疫活性，且可得到有規(guī)律的重復(fù)的結(jié)果。另外在吸附載體后，對(duì)加入的各種試劑產(chǎn)生最小的非特異性吸附，即與陰、陽(yáng)性血清結(jié)合差異較大。
2、抗原效價(jià)的測(cè)定
可采用單方陣或雙方陣試驗(yàn)。①單方陣試驗(yàn)：以不同稀釋度的抗原包被酶標(biāo)板，以常規(guī)的1﹕200倍稀釋的陽(yáng)性血清加入，再加入酶標(biāo)抗體、顯色、測(cè)OD值，以O(shè)D值為1.0時(shí)，相應(yīng)的抗原濃度作為使用效價(jià)；②雙方陣試驗(yàn)比較精確，它既能測(cè)出抗原的最適濃度又能測(cè)出抗體的最適濃度。即將抗原抗體均稀釋成不同濃度進(jìn)行酶標(biāo)抗體反應(yīng)，以血清稀釋倍數(shù)最高的陰、陽(yáng)性血清的光吸收值差最大的所對(duì)應(yīng)的抗原稀釋度為抗原的使用效價(jià)。
已吸附的抗原的固相載體經(jīng)凍干或干燥保存很穩(wěn)定,數(shù)月仍不失活。
