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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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人源細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)
2018-10-25 閱讀(604)
人源細(xì)胞壁主要成分是纖維素,經(jīng)過(guò)有系統(tǒng)的編織形成網(wǎng)狀的外壁??煞譃橹心z層、初生細(xì)胞壁、次生細(xì)胞壁。中膠層是人源細(xì)胞剛分裂完成的子細(xì)胞之間,先形成的間隔,主要成份是果膠質(zhì)(一種多糖類(lèi)),隨后在中膠層兩側(cè)形成初生細(xì)胞壁,初生細(xì)胞壁主要由果膠質(zhì)、木質(zhì)素和少量的蛋白質(zhì)構(gòu)成。次生細(xì)胞壁主要由纖維素組成的纖維排列而成,如同一條一條的線以接近直角的方式排列,再以木質(zhì)素等多糖類(lèi)黏接。
人源細(xì)胞操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 人源細(xì)胞每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。