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細胞培養(yǎng)中包被液您知道嗎?
2019-4-17 閱讀(7273)
細胞培養(yǎng)中包被液您知道嗎?
在培養(yǎng)原代細胞時為了促進原代細胞貼壁需要對使用的T-25/T-75等耗材進行包被處理,常用的包被液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠,其中ScienCell研究實驗室的包被液就包含上述3種產品。
其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物,是帶正電荷的氨基酸,通過改變培養(yǎng)基質表面的電極來促進細胞貼壁。在細胞培養(yǎng)中廣泛用于包被物促進細胞貼壁。除了促進細胞貼壁生長,包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細胞的存活率和促進神經突長出。Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸(PLL,貨號0403)是原液,分子量是70000~150000。包被液多聚賴氨酸以1-2 ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶??蓪?mg/ml的包被液多聚賴氨酸以滅菌雙蒸水稀釋100倍,T-75培養(yǎng)瓶中加入10ml左右,37度孵箱1小時或4度冰箱過夜,用包被液包被好的培養(yǎng)瓶不要放置超過24小時,包被液可重復使用2-3次,注意不要污染。
包被液纖維粘連蛋白是分子量為440-500kDa的糖蛋白,存在于細胞表面蛋白和血漿中。它于細胞膜表面受體和細胞外基質成分結合。ScienCell實驗室的包被液牛血漿纖維粘連蛋白(BPF,貨號8248)使用親和色譜法提純自牛血漿,是促進細胞貼壁和延伸生長的理想基質。包被濃度是2 μg/cm2。如果想達到jia效果取決于細胞類型。
包被液明膠是來自于膠原的高分子量水溶蛋白混合物。0.2%的包被液明膠溶液用于包被培養(yǎng)器皿以促進細胞貼壁。用于分化的人胚胎干細胞,某些原代細胞和永生化細胞。