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細(xì)胞培養(yǎng)中與支原體的戰(zhàn)爭
2019-5-16 閱讀(516)
細(xì)胞培養(yǎng)中與支原體的戰(zhàn)爭
支原體號稱細(xì)胞培養(yǎng)中的大敵。它就像man性du藥，殺細(xì)胞于無形中。據(jù)統(tǒng)計，超過25%的細(xì)胞系中感染了支原體，而研究者大多并不知曉。常規(guī)檢測可以降低支原體意外污染的機(jī)會，但并不能*避免。
在細(xì)胞培養(yǎng)中，我們通常使用0.2微米的濾膜來去除污染物。然而，這道防線只能阻擋細(xì)菌，而無法阻擋支原體。因支原體更?。s為0.15-2 µm），而且形狀靈活，故總是能逃過我們傳統(tǒng)的濾膜。這時，我們有必要升級秘密技巧，與支原體斗爭到底。
如何升級呢？選用孔徑更小的濾膜，這也許是個不錯的主意。目前市場上有多家公司提供0.1微米的濾膜，如賽默飛世爾。Thermo Scientific Nalgene 0.1微米濾器具有*的Nalgene Rapid-Flow™ 膜支持系統(tǒng)，有四種容量可供選擇：150mL、250 mL、500 mL 以及1000 mL。Rapid-Flow™ 系統(tǒng)采用多排柱狀結(jié)構(gòu)，使得膜系統(tǒng)相較于其他過濾商使用的輻射輻條設(shè)計更加均一穩(wěn)定。據(jù)稱，這種設(shè)計特點(diǎn)能使濾膜通過更大的流速和通量。是不是這樣呢？賽默飛世爾的研究人員將Nalgene 0.1微米濾器與市場上的類似產(chǎn)品進(jìn)行了性能比較。
誰來參加這場比賽？除了Nalgene Rapid-Flow™ 1000mL 濾器、Rapid-Flow™ 500mL 濾器，還有兩個強(qiáng)勁的對手，它們分別是M品牌的1000mL 濾器、和C品牌的500mL 濾器。當(dāng)然，這些都是0.1微米PES濾膜。測試的液體是經(jīng)典的細(xì)胞生長培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS（胎牛血清）及RPMI 1640+10% BGS（成牛血清）。
比什么？流速和堵塞體積。研究人員記錄DMEM+10% FBS 和RPMI 1640+10% BGS 每濾出100mL 的時間點(diǎn)，直至濾器堵塞（即每秒濾出一滴液體或過濾100ml 液體超過2 分鐘）或者1L DMEM+10% FBS、RPMI 1640+10% BGS液體過濾完畢。
