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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間:2022-11-21 09:34:51瀏覽次數(shù):203
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操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:人乳腺癌細(xì)胞:Hs 578T
貨號(hào):BJ-X96433
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細(xì)胞系
商品介紹:
名稱 Hs 578T (人乳腺癌細(xì)胞) 種屬 人類 年齡(性別) 女性,74歲 組織來源 乳腺癌 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 Hs 578T細(xì)胞源自乳房癌,它與正常成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細(xì)胞初是多角形的,但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細(xì)胞形態(tài)。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn),Hs 578T細(xì)胞內(nèi)酪蛋白顆粒聚集、橋粒緊密連接、脂質(zhì)體和光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡。Hs 578T細(xì)胞與Hs 578Bst細(xì)胞一樣,未檢測(cè)到雌激素受體和內(nèi)生病毒。 生物安全等級(jí) 1 生長培養(yǎng)基 DMEM+0.01mg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時(shí)間 ~36-54小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性 No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium. 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-7849 ATCC; HTB-126 BCRC; 60120 DSMZ; ACC-781 ECACC; 86082104 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
GST 固定試劑盒1套 MG-132(Proteasome 抑制劑 )1mg
甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶1mg Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 )1g
核酸清除劑1.5mL MEQ,(6- 甲氧 -N- )100mg
非變性法蛋白沉淀試劑盒10 次 m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
微量蛋白沉淀試劑盒50 次 m7G(5′)ppp(5′)A 帽結(jié)構(gòu)類似物25 OD
FITC標(biāo)記的肌側(cè)索硬化蛋白2抗體
FITC標(biāo)記的酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
FITC標(biāo)記的蛋白激酶AKT1,2,3抗體
FITC標(biāo)記的醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體
FITC標(biāo)記的激活素受體相互作用蛋白1抗體
人乳腺癌細(xì)胞:Hs 578T大鼠白介素4(IL-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素4(IL4)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒