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上海邦景實業(yè)有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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售后電話:
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021-57690166
址:
上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
編:
200000
址:
www.bhsy-e.com/
鋪:
http://www.niunang.cn/st582730/
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人結腸癌轉基因細胞:RKO-E6 細胞株類
人結腸癌轉基因細胞:RKO-E6 細胞株類
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 型號
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

更新時間:2023-02-23 09:21:10瀏覽次數:208

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【簡單介紹】
貨號  BJ-X96744
人結腸癌轉基因細胞:RKO-E6公司的各類產品:錨蛋白重復結構域蛋白22抗體 整合素β5抗體
錨蛋白重復結構域蛋白50抗體 整合素β4抗體
氫離子轉運ATP合成酶6G抗體 整合素β3抗體
錨蛋白重復結構域蛋白26抗體 整合素β2/Integrin β2抗體
鐵蛋白Fe65抗體 整合素β1抗體

商品介紹:
名稱   RKO-E6 (人結腸癌轉基因細胞)
別稱 RKOE6

種屬 人類

年齡(性別) 不詳

組織來源 結腸癌,轉染插入到pCMV中的HPVE6

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述 RKO-E6細胞是用脂質體法轉染pCMV-E6的結腸癌RKO細胞系。RKO-E6細胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細胞病毒啟動子的人乳頭狀病毒(HPV)E6癌基因,RKO-E6細胞和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細胞參數改變p53介導的轉錄和凋亡等。

生物安全等級 2 [Contains HPV6 and CMV viral sequences]

生長培養(yǎng)基 MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37

保藏機構 ATCC; CRL-2578

86.jpg

產品名稱

規(guī)格

分類

貨號

人結腸癌轉基因細胞:RKO-E6

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞系

BJ-X96744

實驗要點及說明:
1
.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:          

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1%   I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1Triton   X-100透膜15min;

3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.
研究條件可以人為控制
pH
、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.
研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.
研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.
研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.
研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞0.1mL×10  暗盒 (5×7 英寸 )1

Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞0.1mL×10  氨基磁珠2mL

Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細胞0.1mL×10  氨芐溶液 ,50mg/mL10mL

Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞0.1mL×10  氨芐干粉1g

Tuner(DE3) 感受態(tài)細胞0.1mL×10  φX174RF DNA30μg
Alexa Fluor 555
標記的兔抗羊IgG

Cy5標記的兔抗羊IgG

Cy3標記的兔抗羊IgG

Alexa Fluor 488標記的驢抗羊IgG

辣根過氧化物酶標記的兔抗馬IgM
人結腸癌轉基因細胞:RKO-E6大鼠二酰基甘油(DAG)elisa檢測試劑盒

大鼠二?;视?/span>(DAG/DG)elisa分析檢測試劑盒

大鼠二?;视?/span>(DAG/DG)elisa檢測試劑盒

大鼠法尼醇X受體(FXR)elisa分析檢測試劑盒

大鼠法尼醇X受體(FXR)elisa檢測試劑盒

我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產品僅用于科研




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