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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間：2022-06-06 08:53:14瀏覽次數(shù)：315
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：碘化丙啶(PI)染液(即用型)
英文名稱：PI Staining Solution (Ready-to-use)
產(chǎn)品規(guī)格：150T
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0163881
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái)，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹：
本品是無(wú)菌的即用型PI染色液（溶于PBS），可進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)與DNA結(jié)合，并被活細(xì)胞排斥在外，適合用于流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞活力分析。PI單染用FL2通道檢測(cè)，若與FITC或PE標(biāo)記抗體/蛋白聯(lián)合使用FL3通道檢測(cè)。 碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細(xì)胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基對(duì)之間實(shí)現(xiàn)與雙鏈DNA結(jié)合。PI經(jīng)488 nm熒光激發(fā)，產(chǎn)生相對(duì)較大的斯托克司頻移后，并在617 nm處具有大發(fā)射波長(zhǎng)。另外，PI不能穿透細(xì)胞膜而被排斥在活細(xì)胞外，但是可以穿過(guò)破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。用以上特性，PI可作為細(xì)胞活力分析的熒光探針之一。不僅可單獨(dú)使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活細(xì)胞熒光探針一起使用，同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色和鑒定。也能夠與488 nm激發(fā)的熒光素如FITC和PE等聯(lián)合使用。 使用方法 1）收集細(xì)胞，計(jì)數(shù)，高以1 x 106 cells/100 μl的量加入FACS分選管； 2）加2ml PBS（或HBSS）清洗細(xì)胞，300 x g離心5 min，去上清。重復(fù)一次。 注：若需要用抗體標(biāo)記表面抗原，可在此步之后進(jìn)行。PI不適合與檢測(cè)胞內(nèi)分子的抗體聯(lián)合使用。 3）細(xì)胞清洗后，用100 μl流式細(xì)胞染色緩沖液（flow cytometry staining buffer）重懸細(xì)胞；加入10 μl PI染色液，輕柔混勻，冰上或者室溫避光孵育10-15 min。 4）直接上機(jī)進(jìn)行流式分析。注：PI染色后不可再清洗細(xì)胞。PI染色孵育后盡快上機(jī)檢測(cè)。 注意事項(xiàng) 1）碘化丙啶（PI）是已知的誘變劑，操作過(guò)程中一定要做好防護(hù)工作避免與PI的直接接觸。另外PI溶液在丟棄之前需要先經(jīng)過(guò)活性炭處理。 2）流式細(xì)胞染色緩沖液可配制如下：1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA（或 5% FBS）＋0.1% 疊氮鈉。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身體系調(diào)整。 3）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 儲(chǔ)存條件：4℃，有效期半年 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
水樣品氟元素比色法定量檢測(cè)試劑盒
氟元素待測(cè)樣品處理試劑盒
糖原化學(xué)水解比色法定量檢測(cè)試劑盒
糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
通用型A含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
萊苞迪甙D（標(biāo)準(zhǔn)品） Rebaudioside D 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95.50%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit大鼠高敏甲狀(u-T4)elisa規(guī)格：96T/48T
老鸛草素（標(biāo)準(zhǔn)品） Geraniin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 NEUROG基因甲基化程度定量分析試劑盒盒20
酪醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Tyrosol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 PorcineHeatShockProtein20,HSP-20elisa豬熱休克蛋白20(HSP-20)elisa規(guī)格：96T/48T
雷酚內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Triptophenolide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒
紅素(標(biāo)準(zhǔn)品) Celastrol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠球蛋白A(IgA)elisa
甲素(標(biāo)準(zhǔn)品) Triptolide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列E1(PGE1)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
內(nèi)酯酮（標(biāo)準(zhǔn)品） Triptonide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-parotidductaibodyelisa人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)elisa規(guī)格：96T/48T
類葉升麻苷,毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Acteoside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 植物細(xì)胞壁束縛酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(胞壁)20
卡靈-B(標(biāo)準(zhǔn)品) (-)-Licarin B 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪1(Tie1)elisa規(guī)格：96T/48T
(標(biāo)準(zhǔn)品) Reserpine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體β(PPAR-β)elisa ，英文名： PPAR-β ELISA Kit
碘化丙啶(PI)染液(即用型)白頭翁素 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-HIS培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷A HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-LEU/P培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷B HPLC≥98% 2mg 10倍酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷B HPLC-ELSD≥95% 20mg 10倍酵母菌SD-P/URA培養(yǎng)基100毫升
白頭翁皂苷D HPLC≥98% 5mg 10倍酵母菌SD-P培養(yǎng)基100毫升
白鮮堿 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖)100毫升
白楊素 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖)100毫升
白楊素葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 20mg 10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升
白芷屬腦 HPLC≥98% 20mg 10倍碳酸濃縮緩沖溶液100毫升
百兩金素A HPLC≥98% 20mg 10倍細(xì)菌合成基礎(chǔ)培養(yǎng)液100毫升
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
