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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間：2022-06-15 15:42:31瀏覽次數(shù)：322
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中文名稱：GST瓊脂糖凝膠
英文名稱：Glutathione-Sepharose Resin
產(chǎn)品規(guī)格：10ml
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0164873
產(chǎn)品介紹：
?本產(chǎn)品為基于三甘醇(16原子間隔臂)的瓊脂糖，可快速、溫和、特異性地純化包含結(jié)合序列的非變性蛋白質(zhì)，如-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)、過氧化物酶等，尤其適用于在大腸桿菌、昆蟲細(xì)胞和哺育動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的GST融合表達(dá)蛋白。該填料具有很好的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，使用壽命長，使用方便，批次重復(fù)性好，可一步分離得到純度較高的目標(biāo)蛋白，純化條件溫和，可保證蛋白的活性。 支持物：CL-6B瓊脂糖凝膠 載量：5-10 mg GST標(biāo)簽蛋白/ml 填料 粒徑：50-160μM 注意事項(xiàng)： 1、請勿將 GST瓊脂糖凝膠冷凍、干燥和離心，整個(gè)純化過程中切忌凝膠脫水變干。 2、蛋白層析應(yīng)使用高純度的試劑和水，層析前緩沖液應(yīng)用0.45μM濾膜過濾后使用。另外為防止柱子阻塞，上柱前建議將裂解液進(jìn)行離心，或者使用0.45μM濾膜過濾。 3、GST 融合蛋白與還原型的結(jié)合比較緩慢，為獲得大結(jié)合量，上樣流速建議為：0.2-1ml/min(6ml層析柱)，0.5-2ml/min(12ml層析柱)。對(duì)于吸附效果不好的樣品，可以先把介質(zhì)和樣品混合，輕輕振搖 2-4小時(shí)，再裝柱，用平衡緩沖液進(jìn)行重新平衡、洗脫等操作，另外在細(xì)菌抽提試劑中添加5 mM DTT，可以顯著提高GST標(biāo)簽結(jié)合能力。 4、不同的 GST 融合蛋白取得佳純化效果所需還原型濃度、洗脫體積和洗脫時(shí)間可能有所不同。必要時(shí)需對(duì)流穿液、洗脫液進(jìn)行 SDS-PAGE 以及 Western 雜交分析，以確定佳純化條件。 5、GST 融合蛋白以包涵體形式存在時(shí)不能與介質(zhì)結(jié)合，必須行變性、復(fù)性、透析處理后才能用介質(zhì)進(jìn)行純化。建議優(yōu)化蛋白表達(dá)條件盡量使蛋白可溶性表達(dá)。 6、如后續(xù)實(shí)驗(yàn)需要除去洗脫液中還原型，可采用濾或透析的方法。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
膜相關(guān)結(jié)構(gòu)免疫化學(xué)固著溶液
胞內(nèi)結(jié)構(gòu)免疫化學(xué)固著溶液
冰凍切片組織免疫化學(xué)固著溶液
全組織免疫化學(xué)固著溶液
電鏡檢測免疫化學(xué)固著溶液
小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)elisa ，英文名： PAI-1 ELISA Kit
小鼠降鈣素原(PCT)ELISA檢測試劑盒MouseProcalcitonin,PCTELISAKit 96T/48T
人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)免疫試劑盒 Human melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit
Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)elisa規(guī)格：96T/48T
3’末端DNA探針同位素([α32P]dATP)轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒20次
MouseCytochrome-C,Cyt-Celisa小鼠(Cyt-C)elisa規(guī)格：96T/48T
GST瓊脂糖凝膠小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基（sRANKL）elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)elisa分析檢測試劑盒
小鼠可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 elisa分析檢測試劑盒
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
