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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間：2022-06-24 19:43:53瀏覽次數(shù)：342
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱(chēng)：qPCR MasterMix(TaqMan探針?lè)?，低濃?/span>ROX)
英文名稱(chēng)：2×ByFast Probe qPCR Mix(Low ROX)
產(chǎn)品規(guī)格：1mL|1mL×5|1mL×25
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0164373
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái)，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹：
本制品是一種基于TaqMan等探針的用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR，即探針?lè)?/span>qPCR(Quantitative PCR)或real-time PCR的高品質(zhì)預(yù)混液，主要用于cDNA和基因組DNA等的特異性高靈敏度定量檢測(cè)。由于使用的探針一般是TaqMan探針，所以本方法也常稱(chēng)作TaqMan探針?lè)ā?/span> 本產(chǎn)品特別適合用于低豐度或高特異性的目的基因的定量或定性檢測(cè)。例如一些低豐度的mRNA、lncRNA、小RNA、微生物RNA反轉(zhuǎn)錄后的高靈敏度檢測(cè)，一些相似度較高的常規(guī)染料法難以區(qū)分的同源基因或者基因的SNP檢測(cè)。 本產(chǎn)品的特異性好、靈敏度高：特異性并不僅僅依賴(lài)于PCR引物，還依賴(lài)于探針的特異性，探針和目標(biāo)基因發(fā)生特異性的結(jié)合和降解，才能生成熒光信號(hào)，檢測(cè)靈敏度和特異性通常要顯著高于使用SYBR Green等熒光染料的方法。 本產(chǎn)品可用于多重檢測(cè)：?jiǎn)蝹€(gè)反應(yīng)孔中，不同基因?qū)?yīng)不同探針，不同探針對(duì)應(yīng)不同熒光標(biāo)記，即可進(jìn)行多重?zé)晒舛?span style="font-family:Calibri">PCR檢測(cè)。經(jīng)測(cè)試，在適當(dāng)優(yōu)化引物和探針后，本產(chǎn)品可同時(shí)用于2～3個(gè)基因的檢測(cè)。 本產(chǎn)品使用的ByFast Taq DNA Polymerase是一種與抗體結(jié)合的高品質(zhì)熱啟動(dòng)酶，能夠?qū)崿F(xiàn)便捷高效的熱啟動(dòng)。ByFast Taq DNA Polymerase中的Taq酶與抗Taq酶的單克隆抗體相互結(jié)合，從而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性，這樣可以有效避免在低溫條件下由引物和模板DNA非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)的預(yù)變性步驟中抗體會(huì)被加熱失活，這樣可以確保僅在預(yù)變性后才會(huì)把Taq酶的活性釋放出來(lái)，預(yù)變性之前不會(huì)發(fā)生DNA聚合反應(yīng)，從而大大提高了PCR反應(yīng)的特異性、靈敏度和定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。 本產(chǎn)品包含了ByFast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、穩(wěn)定劑和鎂離子等所有的通用組分，使操作更簡(jiǎn)單、使用更便捷。用戶(hù)只需自備引物、探針、樣品DNA和去離子水即可。 本產(chǎn)品如果用于常規(guī)的96孔板qPCR檢測(cè)(建議反應(yīng)體系為20μL)，每mL 本產(chǎn)品可以進(jìn)行100次檢測(cè)；如果用于常規(guī)的384孔板qPCR檢測(cè)(建議反應(yīng)體系為10μL)，每mL 本產(chǎn)品可以進(jìn)行200次檢測(cè)。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專(zhuān)人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專(zhuān)車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
B1熒光定量檢測(cè)試劑盒
B2比色法定量檢測(cè)試劑盒
B2高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
B3比色法定量檢測(cè)試劑盒
B3高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
和厚樸酚 Honokiol 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR ELISAKitVEGF-D人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D規(guī)格：48T/96T
素（標(biāo)準(zhǔn)品） Tetrodotoxin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠含銅胺氧化酶3(AOC3)elisa ，英文名： AOC3 ELISA Kit
紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Salidroside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanindoleamine2,3-dioxygenase,IDOELISAKit 96T/48T
紅景天苷 Salidroside 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 大鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
葒草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Orientin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱(chēng)RatHbA1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)規(guī)格：96T/48T
XAV-939;NVP-XAV 939 XAV939 質(zhì)量規(guī)格：>98% 化學(xué)合成1樣本
胡黃連苷I（標(biāo)準(zhǔn)品） Picroside I 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitVEGF-C人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C規(guī)格：48T/96T
胡黃連苷 II(標(biāo)準(zhǔn)品) Picroside II 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪酸2(Tie-2)elisa ，英文名： Tie-2 ELISA Kit
胡黃連苷 III（標(biāo)準(zhǔn)品） Picroside III 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit 96T/48T
胡蘿卜苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Daucosterol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人(MGO)試劑盒 Human Methylglyoxal,MGO ELISA KIT
qPCR MasterMix(TaqMan探針?lè)?，低濃?/span>ROX)杯莧甾酮 HPLC≥98% 20mg 2%BIS-ACRYLAMIDE溶液500毫升
北美芹素 HPLC≥98% 20mg 2%戊二固著液(Glaraldehyde)50毫升
貝萼皂苷元 HPLC≥98% 20mg 20%Formalin固著液50毫升
貝母素甲 HPLC≥98% 20mg 20%中性Formalin固著液50毫升
貝母素乙 HPLC≥98% 20mg 200微升1厘米光徑玻璃比色皿1個(gè)
貝母辛 HPLC≥98% 10mg 200微升1厘米光徑石英比色皿1個(gè)
苯并黃素 HPLC≥98% 20mg 200微升1厘米光徑塑料比色皿1個(gè)
HPLC≥98% 0.5ml 20倍SSC分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液500毫升
苯甲酸 HPLC≥98% 250mg 20倍SSPE分子生物級(jí)濃縮緩沖溶液500毫升
苯甲酰芍藥苷 HPLC≥98% 20mg 20毫升玻璃勻漿器1個(gè)
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
