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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-13 11:52:52瀏覽次數(shù)：207
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中文名稱：JM110化學(xué)感受態(tài)細胞
英文名稱：JM110?Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164604
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：
JM110菌株具有硫酸鏈抗性(StrR)；是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的質(zhì)粒DNA，可被對dam、dcm甲基化敏感的內(nèi)切酶切割；lacIq lacZΔM15的存在使JM110可以進行藍白斑篩選，但轉(zhuǎn)化效率不高，JM110感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率約107 cfu/μg。一般不用于質(zhì)粒構(gòu)建，只適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化。 保存條件：-80℃ 基因型： rpsL(Str R)thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB)/F′[traD36 proAB lacIq lacZΔM15] 操作說明： 1.JM110感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中)，加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。 2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。 3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。 4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。 5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。 注意事項： 1.感受態(tài)細胞好在冰上融化。 2.混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。 3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片TUNEL熒光法（Fluorescein）測定試劑盒
石蠟切片TUNEL熒光法（Fluorescein）測定試劑盒
細胞TUNEL比色法定量檢測試劑盒
細胞KUNEL測定試劑盒
冰凍切片KUNEL測定試劑盒
小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員10A(TNFRSF10A)elisa ，英文名： TNFRSF10A ELISA Kit
犬前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Canineprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T
犬生長激素(GH)免疫試劑盒 Dog growth hormone,GH ELISA Kit
英文名稱Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)elisa規(guī)格：96T/48T
沉淀法去內(nèi)毒素試劑盒20次
Ratheatshockprotein40,hSP-40elisa大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)elisa規(guī)格：96T/48T
JM110化學(xué)感受態(tài)細胞植物線粒體膜蛋白提取試劑盒100T
植物線粒體蛋白提取試劑盒50T
植物線粒體蛋白提取試劑盒100T
植物維1(VK1)elisa檢測試劑盒免費代測
植物1(VK1)elisa分析檢測試劑盒
