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上海邦景實業(yè)有限公司

主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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公司信息

聯(lián)人:
劉小姐
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021-52960952
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15000017673
售后電話:
15000017673
真:
021-57690166
址:
上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈
編:
200000
網(wǎng)址:
www.bhsy-e.com/
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http://www.niunang.cn/st582730/
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致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
參考價2990
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    經(jīng)銷商
  • 所在地

    上海市

規(guī)格
50T2990元15 盒 可售

更新時間:2024-02-01 15:25:36瀏覽次數(shù):146

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【簡單介紹】
貨號 BJ-P7905 規(guī)格 50T
保存 -20℃避光
致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:沙苑子探針法PCR鑒定試劑盒載脂蛋白L4(APOL4)ELISA試劑盒桑枝探針法PCR鑒定試劑盒載脂蛋白L3(APOL3)ELISA試劑盒桑葉探針法PCR鑒定試劑盒載脂蛋白L2(APOL2)ELISA試劑盒桑椹探針法PCR鑒定試劑盒載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒

致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
QQ截圖20240112102747.png

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

包裝規(guī)格

致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒

BJ-P7905

50T

運輸:低溫

保存:-20℃避光

有效期:一年

貨期:2-3周

產(chǎn)品用途:公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗

試劑組成:

1.png

特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品。

2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物。

3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。

4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。

5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

操作流程:

RNA 提取 → 反轉(zhuǎn)錄 → 設(shè)計引物 → Q-PCR

一、 總RNA提取

A組織樣本:迅速將新鮮的組織切成合適的大小,在液氮中充分研磨后加裂解液裂解,或直接加入裂解液后用勻漿器勻漿。每30-50mg組織加1ml Trizol。

B全血樣品:加入3-5倍體積的紅細胞裂解液到血樣中,室溫孵育10min,室溫3500rpm離心6min。棄上清,原每2-3ml全血樣品加1mL Trizol。

C細胞樣品:懸浮液中生長的細胞,通過離心收集細胞后,每1×105?106細胞加入1mL Trizol,移液器吹打混勻,直接裂解或-80℃儲存一個月。貼壁生長的細胞,有兩種處理方法。一種是移除培養(yǎng)基后,將1mL Trizol直接加入直徑3.5cm的培養(yǎng)皿中裂解細胞?;蚴窍扔脤①N壁細胞消化下來并收集后,再加入1mL Trizol進行裂解。(Note:加入Trizol前, PBS充分洗滌細胞去除殘余培養(yǎng)基。)

二、直接法

1)加入1ml Trizol試劑,混勻,冰上孵育10min。

2)4℃,12000rpm離心10min,小心轉(zhuǎn)移上清液到不含顆粒的新EP管中。

3)加入200ul氯仿,劇烈振蕩15秒,室溫孵育5min。

4)4℃,12000rpm離心15min?;旌弦悍秩龑樱ㄗ钕旅娴穆确掠袡C相,中間相和上層水相。小心轉(zhuǎn)移上層水相到新的EP管(大約60%體積的Trizol),不要吸取中間相,可留下少量上層液體!(Note:質(zhì)量比數(shù)量更重要?。?/span>

5)加入等體積的異丙醇,輕輕地顛倒混勻約10次,室溫放置10min。

6)4℃,12000rpm離心10min。棄上清,1ml 75%乙醇洗滌RNA沉淀兩次。

7)4℃,12000rpm離心5min,棄上清,室溫下風干5-10min(不要太干,過度干燥會導致RNA難溶解!)。將RNA溶于15μl-50μlDEPC水中。

8)立即進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),或先-80℃長期保存。

5.jpg

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注意事項:

1、所有步驟均應(yīng)在超凈工作臺上進行,超凈臺紫外照射至少15min。

2、所有試劑應(yīng)為此實驗專用。

3、使用75%乙醇或其他去污劑擦拭工作臺,避免表面污染。

4、進入熒光定量PCR 操作實驗室后需要佩戴一次性無菌口罩、無菌乳膠手套、實驗中盡量避免與同事交談,防止PCR 模板污染。

5、實驗中使用各種規(guī)格的離心管,槍頭及配制試劑和溶解沉淀用的水,均應(yīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)處理后使用,以去除吸附的RNA酶污染。

6、使用Trizol試劑時,避免接觸皮膚或衣服。避免吸入蒸氣。

7、qPCR反應(yīng)需要qPCR級水,試劑和試管。請務(wù)必使用正確類型的qPCR光學PCR管和蓋子。不可用普通的PCR管。

8、加樣前,先布局,規(guī)劃加樣順序以避免交叉污染。

9、所有實驗應(yīng)均應(yīng)設(shè)置無模板對照,其中包含除DNA或cDNA樣品以外的所有反應(yīng)組分。

10、先配制qPCR反應(yīng)混合液,減少誤差。

11、加樣后上機前,務(wù)必通過瞬離將反應(yīng)液離至管底,并消除溶液中的氣泡,因為氣泡會干擾熒光檢測且降低酶活性,從而降低擴增效率。





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