TTC染色液(2%)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC),分子量為334.80,分子式為C19H15ClN4,CAS號(hào)為298-96-4。 TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物,初用于檢測(cè)種子生存能力,后來(lái)用于染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞。TTC是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,TTC與正常組織中的呼吸酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)呼吸酶活性下降,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白色,該染色是一種用于評(píng)價(jià)組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法。 TTC染色液(2%)對(duì)心肌梗死及腦組織壞死區(qū)的觀(guān)測(cè)較電鏡早3~6h,較光鏡早24h,多用于尸檢中的新鮮心臟組織和腦組織以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型早期梗死組織的染色。其特點(diǎn):①TTC染色直接取材于新鮮組織即可染色,無(wú)需固定、包埋等步驟;②TTC染色時(shí)間短,一般20~30min;③TTC染色液可重復(fù)使用,10ml可染20張片子。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品 | 規(guī)格一 | 規(guī)格二 | Storage |
TTC Stain(2%) | 50ml | 100ml | 4℃避光 |
使用說(shuō)明書(shū) | 1份 |
自備材料:
1、生理鹽水2、低溫冰箱3、4%多聚甲醛或10%中性福爾馬林
操作步驟(僅供參考):
(一)腦組織染色
1、取待檢腦組織樣本(一般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦),取出后-20℃速凍20~30min,便于切片。2、將待檢腦組織切片,一般動(dòng)物樣本層厚2~3mm,人的樣本層厚3~5mm,可連續(xù)切4~5張。刀在腦前極與視交叉連線(xiàn)中點(diǎn)處;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間(參考:張均田主編,現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法)。3、切片入TTC Stain(2%),避光浸染25~35min。4、切片入4%多聚甲醛或10%中性福爾馬林中固定4~24h。5、吸干組織表面清水,應(yīng)用IPP等圖像分析系統(tǒng)測(cè)量腦梗死面積并計(jì)算大腦梗死體積。(二)種子染色
1、取不同活力的種子用刀片做橫切和沿種胚*準(zhǔn)確縱切,取每粒種子的一半備用。
2、將上述種子置于TTC染色液(2%)中,37℃避光孵育20min。
3、倒出染色液,自來(lái)水沖洗2-3次,立即觀(guān)察種胚著情況。
染色結(jié)果:
正常心肌或腦組織 | 紅色 |
心肌或腦梗壞死區(qū) | 蒼白色 |
缺血腦組織 | 介于紅色與蒼白色之間 |
注意事項(xiàng):
- TTC Stain(2%)對(duì)人體有輕微刺激性,請(qǐng)注意小心防護(hù)。
- 取腦時(shí)應(yīng)仔細(xì)保持大腦的完整性。
- 如果染色效果不佳,應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
- 樣本越新鮮越好,為了防止正常心肌及腦組織的酶活性減弱或消失,應(yīng)盡快染色。
- 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6個(gè)月有效。