Goldner三色染色液
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅O 法、Goldner三色染色法等。Goldner 三色染色又稱(chēng)戈德納三色染色,與 Masson 三色染色類(lèi)似,三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。
三色染色液染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。該染液多用于骨類(lèi)物質(zhì)的染色,對(duì)細(xì)胞染色效果較好,尤其適用于代謝性疾病(Paget 病、骨性營(yíng)養(yǎng)不良等)的研究,以評(píng)估成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性,并容易辨認(rèn)骨髓中的轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品 | 6×50ml | 6×100ml | Storage |
試劑(A) :Weigert A1:Weigert 染液 A | 25ml | 50ml | RT 避光 |
鐵* A2: Weigert 染液 B | 25ml | 50ml | RT |
臨用前,取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵*,不宜提前配制。 |
試劑(B): 酸性分化液 | 50ml | 100ml | RT |
試劑(C): Acid Ponceau 染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 |
試劑(D): 弱酸溶液 | 50ml | 100ml | RT |
試劑(E): Orange G 染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 |
試劑(F): 亮綠染色液 | 50ml | 100ml | RT 避光 |
使用說(shuō)明書(shū) | 一份 |
自備材料:
1、系列乙醇
2、蒸餾水
操作步驟 (僅供參考) :
1、切片二甲苯脫蠟或脫塑料,乙醇漂洗,入水。
2、入配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 20~30min。
3、流水沖洗 1min,用酸性分化液迅速分化(一般<5s)。
4、流水沖洗 5min,蒸餾水稍洗。
5、入 Acid Ponceau 染色液染色 5min。
6、在上述過(guò)程中按蒸餾水:弱酸溶液=4:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 15~30s。
7、入 Orange G 染色液染色,直至 Ponceau 染色液,一般需要 3~10min。
8、用配制好的弱酸工作液沖洗 15~30s。
9、直接入亮綠染色液中染色 5min。
10、用配制好的弱酸工作液沖洗 3 次,每次 15s。
11、蒸餾水沖洗,吸干或晾干,無(wú)水乙醇快速脫水,中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果 :
礦化骨 | 綠色 |
類(lèi)骨質(zhì) | 橙色-紅色 |
軟骨 | 紫色 |
細(xì)胞核 | 藍(lán)色-灰色 |
注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用,使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。
2、取A1、A2等量混合即為Weigert 鐵蘇木素染液,一般24h失去染色力。
3、酸性分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類(lèi)別和新舊而定。
4、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制0.1~1%乙酸溶液予以替代。
5、Orange G染色液染色時(shí)在鏡下控制,以麗春紅脫去為準(zhǔn)。
有效期:12 個(gè)月有效。