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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間：2018-05-17 11:50:27瀏覽次數(shù)：230次
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Mouse interleukin-1 beta ELISA kit
規(guī)格： 96T
檢測(cè)范圍： 12.5pg/ml→800pg/ml。
敏感性： ＜1pg/ml
特異性： 系統(tǒng)和其它白介素?zé)o交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月（4℃）；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
Mouse interleukin-1 beta ELISA kit
規(guī)格： 96T
檢測(cè)范圍： 12.5pg/ml→800pg/ml。
敏感性： ＜1pg/ml
特異性： 系統(tǒng)和其它白介素?zé)o交叉反應(yīng)。
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
Mouse interleukin-1 beta ELISA kit工作原理
Interleukin-1β，IL-1β，白介素 1β。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過(guò)程中起中心作用。類(lèi)風(fēng)濕、結(jié)腸
炎等病癥也和 IL-1β的產(chǎn)生過(guò)多有關(guān)。IL-1α和 IL-1β有 25%的同源性。合成 IL-1β的細(xì)胞很廣
泛，包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形細(xì)胞、NK 細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。兩者合成時(shí)都是
31KDa 的前體，經(jīng)剪切后成為 17.4KDa 的成熟蛋白質(zhì)。IL-1β前體在細(xì)胞內(nèi)合成，并無(wú)生物學(xué)活
性。被 IL-1β轉(zhuǎn)化酶（ICE）剪切為成熟形態(tài)后排出到細(xì)胞外。本試劑盒所用的標(biāo)準(zhǔn)品是重組小
鼠的白介素 1β，總計(jì) 152 個(gè)氨基酸，分子量 17.4KDa。
所提供的 IL-1βELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（EnzymeLinked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。預(yù)先包被的抗體為單克隆抗體。檢測(cè)相抗體為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS 或 TBS 洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò) PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB 顯色。TMB 在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 IL-1β呈正相關(guān)。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清標(biāo)本用本試劑盒所檢測(cè)的 IL-1β主要是有活
內(nèi)容 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
預(yù)包被抗 interleukin-1抗體的 96 孔板 | 96T | 1 |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 10ng/管 | 2 |
生物素標(biāo)記 | 130ul | 1 |
親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物 | 130ul | 1 |
樣品稀釋液 | 30ml | 1 |
抗體稀釋液 | 12ml | 1 |
ABC 稀釋液 | 12ml | 1 |
TMB 顯色液 | 10ml | 1 |
TMB 終止液 | 10ml | 1 |
洗滌緩沖液(25X) | 20ml | 1 |
封板膜 |
| 2 |
說(shuō)明書(shū) |
| 1 |
需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)。
3. 恒溫箱
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍，成 1X 洗滌緩沖液。
注意事項(xiàng)
1． 使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無(wú)色透明溶液，若發(fā)現(xiàn)顏色異常，請(qǐng)及時(shí)與廠家。
2． 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
3 要嚴(yán)格避免操作過(guò)程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。
4． 為免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
5． 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
6. 本公司提供的 96 孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板，用戶可按需求使用；剩余的酶標(biāo)板請(qǐng)
按保存條件貯存。
7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時(shí)應(yīng)避免用力過(guò)大導(dǎo)致液體濺出。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi)，浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
樣品的準(zhǔn)備和保存
樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存，且避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清——用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 1500×g 15 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血，抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘，以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞裂解液——對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用槍吹打把細(xì)胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后，10000—14000g 離心 3-5 分鐘，取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
樣品稀釋的一般原則
用戶須估計(jì)樣品待測(cè)因子的含量，決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)，以使稀釋后樣品中待測(cè)因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測(cè)范圍。根據(jù)待測(cè)因子含量高、中、低的不同，分別采取不同的
稀釋方案：
高——指待測(cè)因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。
中——指待測(cè)因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。
低——指待測(cè)因子在 31.2-2000pg/ml。按 1：2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。
特低——指待測(cè)因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋?zhuān)虬?1：2 稀釋。
操作程序總結(jié)：
1． 加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。
2． 加生物素標(biāo)記抗體，37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。
3． 加 ABC，37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。
4． TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。
5． 加入 TMB 終止液，讀數(shù)。
鴨 甲狀腺素 T4 thyroxine
鴨 促腎上腺皮質(zhì)激素 ACTH adrencocorticotropic hormone
鴨 總甲狀腺激素 TT4 Total thyroxine
鴨 組胺 HIS Histamine
鴨 I群禽腺病毒4型抗體 FAV-Ⅰ-Ab FAV-Ⅰ-Ab
鴨 坦布蘇病毒E蛋白 TV-EP Tembusu Virus E protein
鴨 乙型肝炎E抗原 HBeAg hepatitis B virus e antigen
鴨 乙型肝炎病毒表面抗原 HBsAg hepatitis B virus surface antigen
鴨 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 ALT Alanine transaminase
鴨 疫里默氏桿菌抗體 Ra-Ab Ra-Ab
鴨 糖皮質(zhì)激素 GC glucocorticoid
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