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更新時(shí)間：2018-05-22 09:24:54瀏覽次數(shù)：177次
聯(lián)系我時(shí)，請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線NCI-H292人肺癌細(xì)胞（淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）此細(xì)胞株源自肺粘膜上皮細(xì)胞癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。這個(gè)細(xì)胞系用化學(xué)合成培養(yǎng)基分離得到，并轉(zhuǎn)換成含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。此細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)在亞顯微結(jié)構(gòu)上保留了粘膜上皮細(xì)胞的特性，并表現(xiàn)出鱗狀分化的多種標(biāo)記。
英文名稱：Human Lung Cancer Cells
1） 來源：肺
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、
NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)
英文名稱：Human Lung Cancer Cells
規(guī)格：1*10 6
細(xì)胞介紹
此細(xì)胞株源自肺粘膜上皮細(xì)胞癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。這個(gè)細(xì)胞系用化學(xué)合成培養(yǎng)基分離得到，并轉(zhuǎn)換成含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。此細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)在亞顯微結(jié)構(gòu)上保留了粘膜上皮細(xì)胞的特性，并表現(xiàn)出鱗狀分化的多種標(biāo)記。
一、細(xì)胞特性
1） 來源：肺
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細(xì)胞收到后處理
NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細(xì)胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
三、細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
（1）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
★ 注：如運(yùn)輸過程中導(dǎo)致細(xì)胞污染或者死亡，我們將無條件補(bǔ)發(fā) 收貨后十個(gè)工作日內(nèi)有其他問題提供照片可半價(jià)重發(fā)。
相關(guān)細(xì)胞系列表：
人慢性髓系白血病阿霉素耐藥株K562A 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml Farage細(xì)胞
人胃癌細(xì)胞SNU-216 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml FHs74Int細(xì)胞
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV-2 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml G-401細(xì)胞
人皮膚鱗癌細(xì)胞A431 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml GBC-SD細(xì)胞
大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株P(guān)C12（分化） 大鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml GOS-3細(xì)胞
舌癌cal-27 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml GS-HepG2細(xì)胞
胃腺癌細(xì)胞株SGC7901 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml H4細(xì)胞
胃腺癌細(xì)胞株BGC823 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml H9細(xì)胞
乳腺癌細(xì)胞SK-BR-3 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HaCaT細(xì)胞
小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞MC3T3-E1 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HAL-01細(xì)胞
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299 人源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HCC1937細(xì)胞
小鼠成肌細(xì)胞 C2C12 小鼠源 1×10^6 細(xì)胞數(shù)/ml HCC38細(xì)胞
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