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更新時(shí)間：2018-06-11 20:50:03瀏覽次數(shù)：273次
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大提柱式血液DNAou本產(chǎn)品是基于離心柱/硅膠膜DNA吸附原理的、專門(mén)用于從新鮮或冷凍的動(dòng)物（包括人和禽類）抗凝全血中提取基因組DNA的大提試劑，它是柱式血液DNAout（CAT#:60306-50）的大提升級(jí)版，具有下列特點(diǎn)：
1. 處理量更大，一次可以處理5-50 mL血液（對(duì)哺乳動(dòng)物血液）。t
大提柱式血液DNAout
名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 手冊(cè) |
大提柱式血液DNAout | 4次 | 6詢價(jià) |
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本產(chǎn)品是基于離心柱/硅膠膜DNA吸附原理的、專門(mén)用于從新鮮或冷凍的動(dòng)物（包括人和禽類）抗凝全血中提取基因組DNA的大提試劑，它是柱式血液DNAout（CAT#:60306-50）的大提升級(jí)版，具有下列特點(diǎn)：
1. 處理量更大，一次可以處理5-50 mL血液(對(duì)哺乳動(dòng)物血液)。
2. 吸附量大，一個(gè)離心吸附柱多可以吸附800 μg的DNA。
3. DNA純凈，OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質(zhì)和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。
4. 產(chǎn)量高，一般為200-600 μg/10 mL全血(對(duì)哺乳動(dòng)物血液而言)。
5. 操作簡(jiǎn)單，整個(gè)過(guò)程約20分鐘，全室溫操作，適合大規(guī)模樣品處理。
6. 安全無(wú)毒，本試劑盒不使用苯酚和，對(duì)人體無(wú)毒，無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。
7. 本產(chǎn)品也可用于禽類血液等非哺乳動(dòng)物血液，但各成分用量需要適當(dāng)優(yōu)化。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
RNase-Free TE Buffer（無(wú)RNase的TE緩沖液），pH8.0
RNase-Free Tris-HCl Solution（無(wú)RNase的Tris-HCl溶液）,1M,pH7.4
RNase-Free Tris-HCl Solution（無(wú)RNase的Tris-HCl溶液）,1M,pH8.0
Saponine Permeating Solution in PBS（皂素PBS滲透液）,5X
Saponine Permeating Solution in TBS,5X
SDS Solution（SDS溶液）,10%
SDS Solution（SDS溶液），20%，pH7.2
Semi Dry Blot Transfer Buffer
Separating or Resolving Buffer（分離膠緩沖液）
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