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痰液DNAout

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

痰液DNAout痰液是重要的臨床樣品，可以用于診斷肺癌，肺結(jié)核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手，為此本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品，于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA，用于后續(xù)的分子生物學(xué)分析。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 每次可以處理10-20 mL痰液，得到2-5 ug DNA。

詳細(xì)介紹

痰液DNAout

名稱(chēng)	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
痰液DNAout	50次	990元

痰液是重要的臨床樣品，可以用于診斷肺癌，肺結(jié)核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手，為此本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品，于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA，用于后續(xù)的分子生物學(xué)分析。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 每次可以處理10-20 mL痰液，得到2-5 ug DNA。
2. 純度高,可直接用于后續(xù)得PCR檢測(cè)。
3. 一管式操作，減少污染，節(jié)約成本。
4. 含痰液保存液（溶液A），便于取樣和運(yùn)輸。
5. 無(wú)毒環(huán)保，不需要使用苯酚和氯等有毒的有機(jī)溶液。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH7.4.
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH7.5
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH7.6
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH8.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.0
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.2
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.4
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.5
Potassium Phosphate Solution，0.5M, pH7.6