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凋亡DNAout

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凋亡DNAout細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是生命個(gè)體中的調(diào)控基因?yàn)榱司S持個(gè)體生命,調(diào)控細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝,促使不需要的細(xì)胞或者具有危險(xiǎn)性的細(xì)胞自我凋亡的現(xiàn)象,與細(xì)胞的發(fā)生、分化、生理現(xiàn)象(特別在免疫方面)有著密切關(guān)系。細(xì)胞凋亡時(shí),染色體DNA以核小體為單位(185 bp)進(jìn)行DNA片斷化產(chǎn)生DNA Ladder,這些被片斷化了的DNA片段,可以使用電泳的方法進(jìn)行檢出。本試劑盒能夠從培養(yǎng)細(xì)

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凋亡DNAout

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細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是生命個(gè)體中的調(diào)控基因?yàn)榱司S持個(gè)體生命,調(diào)控細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝,促使不需要的細(xì)胞或者具有危險(xiǎn)性的細(xì)胞自我凋亡的現(xiàn)象,與細(xì)胞的發(fā)生、分化、生理現(xiàn)象(特別在免疫方面)有著密切關(guān)系。細(xì)胞凋亡時(shí),染色體DNA以核小體為單位(185 bp)進(jìn)行DNA片斷化產(chǎn)生DNA Ladder,這些被片斷化了的DNA片段,可以使用電泳的方法進(jìn)行檢出。本試劑盒能夠從培養(yǎng)細(xì)胞中選擇性地提取片斷化DNA,能夠大限度地抑制起妨礙作用的完整的染色體DNA的混入,并可以通過電泳法進(jìn)行高效檢出。具有下列特點(diǎn):
1. 操作簡(jiǎn)便:使用Ready-to-Use型試劑。
2. 高靈敏度:能夠高靈敏度地檢出凋亡細(xì)胞的片斷化DNA。
3. 高特異性:抑制完整的染色體DNA的混入,選擇性地提取斷片化DNA。
4. 快速操作:整體操作約需2.5小時(shí)。
5. 定 量 性: 與熒光色素組合可以對(duì)片斷化DNA進(jìn)行定量。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:
Phosphate Buffer,0.5M, pH7.6  
Phosphate Buffer,0.5M, pH8.0  
Phosphate Buffer,0.5M, pH8.5 
Phosphate Buffer,0.5M, pH9.0 
Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5 
Phosphate Buffered RIPA 
Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X
Phosphate Buffered RIPA,2X
Phosphate Buffered Saline (PBS),10X, pH7.4 


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