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上海聯(lián)邁生物工程有限公司


超快核酸銀染試劑盒

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更新時間:2018-06-12 13:28:11瀏覽次數(shù):307次

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產(chǎn)品簡介

超快核酸銀染試劑盒核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,也用于瓊脂糖凝膠染色,其靈敏度比EB高200倍,常用于檢測SSR標(biāo)記、SNP標(biāo)記。但常規(guī)的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。為解決此問題,本公司推出本產(chǎn)品,其

詳細介紹

 

超快核酸銀染試劑盒

名稱

規(guī)格

價格

手冊

超快核酸銀染試劑盒

1000mL

1290元

 

核酸銀染的原理是銀離子(Ag+)可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色,也用于瓊脂糖凝膠染色,其靈敏度比EB高200倍,常用于檢測SSR標(biāo)記、SNP標(biāo)記。但常規(guī)的銀染方法由固定、氧化、染色、顯影、終止等步驟組成,操作十分繁瑣,尤其不適用于大批量實驗。為解決此問題,本公司推出本產(chǎn)品,其特點如下:
1. 超快,整個過程只需要20分鐘。
2. 操作簡單,只有染色和顯影兩步。
3. 靈敏度跟常規(guī)方法相當(dāng),EB高200倍,能檢測到10ng的DNA條帶。
4. 可以用于檢測10 nt以上的DNA Oligo或RNA Oligo,所以可以用于miRNA的PAGE電泳。
5. 兩個成分都是現(xiàn)用現(xiàn)配,可重復(fù)性好。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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