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超級雜交液B（含甲酰胺）

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更新時間：2018-06-12 15:55:00瀏覽次數(shù)：460次

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產(chǎn)品簡介

超級雜交液B（含甲酰胺）本系列產(chǎn)品是即用型核酸雜交液，可以用于各種條件下的合適、基于膜的雜交（包括Southern Blot和Northern Blot）。其特點是：核酸雜交一般是指用一種標記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交，由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子（靶分子）。核酸雜交是分子生物學的基本技術(shù)之一，應用非常廣泛。由于核酸雜交效率受印跡膜種類、雜交溫度、探針濃度、雜交液離子強度、

詳細介紹

超級雜交液B（含甲酰胺）

名稱	規(guī)格	價格	手冊
超級雜交液B（含甲酰胺）	100mL	詢價

本系列產(chǎn)品是即用型核酸雜交液，可以用于各種條件下的合適、基于膜的雜交（包括Southern Blot和Northern Blot）。其特點是：核酸雜交一般是指用一種標記的核酸探針與印跡膜上的核酸進行雜交，由此檢測印跡膜上是否存在與探針同源的核酸分子（靶分子）。核酸雜交是分子生物學的基本技術(shù)之一，應用非常廣泛。由于核酸雜交效率受印跡膜種類、雜交溫度、探針濃度、雜交液離子強度、雜交液pH及雜交液粘度等因素影響，用戶自己摸索和優(yōu)化相關(guān)條件非常繁瑣，因此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 既可用于Southern雜交（靶分子為DNA），也可用于和Northern雜交（靶分子為RNA），還可以用于菌落雜交，基因芯片等雜交。

2. 既可以用于同位素探針的雜交，也可以用于非同位素探針的雜交。

3. 既可以使用DNA（包括DNA Oligo）探針，也可以使用RNA探針（包括RNA Oligo）

4. 含多種能夠促進雜交的聚合物，使雜交反應能在6~12小時完成，而常規(guī)雜交反應一般需要12~24 小時。

5. 含多種封堵劑，能阻印跡膜對探針分子的非特異性吸附，能有效降低背景信號，延長曝光時間以便檢測到低拷貝的RNA（Northern）和單拷貝的基因（Southern）。

6. A型不含甲酰胺，B型含50%的甲酰胺。后者使雜交在較低溫度就可以完成，適合Tm較高的分子雜交（如RNA-RNA和RNA-DNA雜交）。

7. 跟各種常用的印跡膜兼容，包括硝酸纖維素膜和尼龍膜。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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