*0化學感受態(tài)細胞

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更新時間：2018-06-14 13:28:57瀏覽次數(shù)：739次

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上海聯(lián)邁生物工程有限公司

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產品簡介

*0化學感受態(tài)細胞本產品是采用大腸桿菌*0菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA 的化學轉化。該菌株是一種用于鋪制與培養(yǎng)質粒平板和粘粒平板的重級缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因產物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)α 互補，可用于藍白斑篩選。使用pUC19質粒檢測，轉化效率可達108。本感受態(tài)細胞具有鏈霉素抗性。
菌株的基因型：F- mcrA Δ（mrr-hs

詳細介紹

*0化學感受態(tài)細胞

名稱	規(guī)格	價格	手冊
*0化學感受態(tài)細胞	0.1mL×10	詢價

本產品是采用大腸桿菌*0菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA 的化學轉化。該菌株是一種用于鋪制與培養(yǎng)質粒平板和粘粒平板的重級缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因產物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)α 互補，可用于藍白斑篩選。使用pUC19質粒檢測，轉化效率可達108。本感受態(tài)細胞具有鏈霉素抗性。菌株的基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr) endA1 nupG

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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