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微量蛋白沉淀試劑盒

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更新時間：2018-06-15 15:56:06瀏覽次數(shù)：163次

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產(chǎn)品簡介

微量蛋白沉淀試劑盒本產(chǎn)品用于沉淀濃縮微量蛋白質(zhì)樣品，并在此過程中去除掉蛋白質(zhì)樣品中的干擾下一步實驗的物質(zhì)，其原理是通過酸性有機溶劑使蛋白質(zhì)變性，溶解度降低，在離心條件下沉淀，而達到沉淀濃縮的目的。它具有下列特點：
1. 方便，即開即用，不需要單獨準(zhǔn)備試劑，優(yōu)化條件。

詳細介紹

微量蛋白沉淀試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
微量蛋白沉淀試劑盒	50次	590元

本產(chǎn)品用于沉淀濃縮微量蛋白質(zhì)樣品，并在此過程中去除掉蛋白質(zhì)樣品中的干擾下一步實驗的物質(zhì)，其原理是通過酸性有機溶劑使蛋白質(zhì)變性，溶解度降低，在離心條件下沉淀，而達到沉淀濃縮的目的。它具有下列特點：

1. 方便，即開即用，不需要單獨準(zhǔn)備試劑，優(yōu)化條件。

2. 快速，整個過程可以在一小時內(nèi)完成。

3. 靈敏度高，能濃縮蛋白質(zhì)總量只有1 μg的蛋白質(zhì)（在200 μL體系中），得到的蛋白沉淀可以溶解在任何體積的自備后續(xù)緩沖液中。

4. 去污染效果好，能有效去除污染的鹽離子、還原劑、去污劑、Ampholine等小分子，可用于許多實驗的預(yù)處理，便于下一步操作。

5. 與多種后續(xù)試驗兼容，本方法與SDS-PAGE、2D電泳、等電點電泳（IEF）、各種方法的蛋白定量、胰蛋白酶酶切等后續(xù)實驗兼容，得到的蛋白質(zhì)可以直接用于上述實驗。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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