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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-06-19 14:21:33瀏覽次數(shù)：358次
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淋巴細胞分離液A型（人）本產(chǎn)品是基于聚蔗糖（Ficoll 400）和泛影葡胺的混合物，專門用于離心法分離人血液單個核細胞（包括淋巴細胞和單核粒細胞）的標準溶液。它具有下列特點：
1. 即開即用，非常方便。
淋巴細胞分離液A型（人）
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
淋巴細胞分離液A型（人） | 100mL | 詢價 |
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本產(chǎn)品是基于聚蔗糖（Ficoll 400）和泛影葡胺的混合物，專門用于離心法分離人血液單個核細胞(包括淋巴細胞和單核粒細胞)的標準溶液。它具有下列特點：
1. 即開即用，非常方便。
2. 具有低粘度、低滲透壓、無毒特點。
3. 使用簡單，將本產(chǎn)品放置在管底層，鋪上抗凝全血后低速離心后即可。吸取血漿層和分離液界面的白膜狀條帶，該層細胞洗滌去除血小板得到純凈的單個核細胞。紅細胞和多核粒細胞密度大于分層液而沉積于管底。
4. 純度高，所得單核粒細胞純度~95%，淋巴細胞純度90~95%，
5. 回收率約80%以上。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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