隨著各領(lǐng)域的發(fā)展,色譜柱技術(shù)也面臨著一些新的需求,包括更高的分離效率、更快的分離速度、更好的化學(xué)穩(wěn)定性、更大的峰容量及更適宜的分離模式等。那么如此常見(jiàn)且消耗量巨大的實(shí)驗(yàn)室耗材,在使用上有什么禁忌呢?怎樣維護(hù)才能延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命呢?一起來(lái)了解一下吧。 色譜柱的使用禁忌
01.避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。
02.避免直接改變?nèi)軇┑慕M成
在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然。且在使用次洗脫能力?qiáng)的洗脫液沖洗色譜柱時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
03.避免色譜柱反沖
一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說(shuō)明書(shū)上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。
04.避免流動(dòng)相使用不當(dāng)而破壞固定相
選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
05.禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
06.禁止將緩沖溶液長(zhǎng)時(shí)間存放在色譜柱內(nèi)
保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿(mǎn)乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
07.禁止色譜柱未經(jīng)處理直接封存
色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗;含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長(zhǎng)期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開(kāi)機(jī)沖洗15分鐘。
怎么樣?以上7大禁忌,你都成功避免了么?成功的請(qǐng)給自己鼓個(gè)掌!如果你仍然對(duì)液相色譜柱的使用和維護(hù)一知半解,不妨來(lái)了解一下這門(mén)《液相色譜柱的使用和維護(hù)》,快按照下文方式領(lǐng)取吧!
01.機(jī)構(gòu)介紹
大連依利特分析儀器有限公司以科技創(chuàng)新為動(dòng)力,以質(zhì)量穩(wěn)定為根本,以服務(wù)誠(chéng)信為原則,專(zhuān)注于液相色譜儀研發(fā),是高效液相色譜儀、色譜工作站、色譜柱等液相色譜行業(yè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的主持起草單位。
02.你將獲得
從色譜柱的分類(lèi)和連接開(kāi)始,介紹了色譜柱的長(zhǎng)度、流速等參數(shù)與色譜柱背壓的關(guān)系,色譜填料常見(jiàn)的參數(shù)指標(biāo),色譜柱常見(jiàn)的分離模式以及分離機(jī)理,使對(duì)色譜柱有基礎(chǔ)的了解。講座著重介紹了影響色譜柱分離的影響因素,以及改善分離效果常用的調(diào)節(jié)方法。最后對(duì)色譜柱使用過(guò)程中注意的問(wèn)題進(jìn)行說(shuō)明,并對(duì)出現(xiàn)的異常問(wèn)題給出了解決方案。