在實驗室，對試劑預備一般不太留神，一般的做法是，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，ELISA試劑盒質量確保是一個復雜的進程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質量。而忽略了這種做法有或許影響后面溫育時刻不夠的問題，其直接的效果是對一些弱陽性標本的檢測呈現假陰性。 ELISA試劑盒檢測效果也是有三大條件的，下面就讓咱們來詳細看看是哪些吧！
一、標本因素
血清標本可按慣例方法搜集，應留神防止溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本或許會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久，其間的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘說板式ELISA各個操作進程的留神要害，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器合作運用，嚴峻遵從劃定操作，必能得出正確的效果。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留神不可濺起，不可產氣憤泡。有此測定需用稀的血清，可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
二、固相載體
ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，海內醫(yī)學檢修一般均用板式點。除特殊情況外，在醫(yī)學檢修中均以血清作為檢測標本。加酶結合物運用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液進程靈敏結束。如有細菌污染，菌體中或許含有內源性HRP，也會發(fā)生假陽性反應。每次加標本應更換吸嘴，以發(fā)生穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。的試劑，杰出的儀器和準確的操作是確保ELISA試劑盒檢測效果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包含用于洗刷的，應為新鮮的和高質量的。有些標本可直接進行測定，有些則需經預處理。
三、ELISA加樣進程
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。凍住血清融解后，蛋白質部分濃縮，散布不均，應充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上激烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝結、血kuai縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標本，然后在微型轟動器上轟動1分鐘以確保混和。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超越一周測定的需低溫冰存?？捎米鱁LISA測定的標本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其間某種抗體 或抗原成份，ELISA試劑盒中本次實驗不需用的部分應及時放回冰箱保留。
