ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中要害的一步，稍有不小心將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)滿盤皆輸，怎么安全，快捷的處理樣本，為幫忙大家了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及要求。
我司何做出了以下的分析：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積，應(yīng)再次離心。操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)排泄性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)重復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清 。保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切開(kāi)標(biāo)本后，稱取分量。參加一定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免重復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3按捺辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA技能的操作關(guān)鍵
良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)成果可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗(yàn)一般均用板式點(diǎn).本文將敘說(shuō)板式留意關(guān)鍵,要詳細(xì)的運(yùn)用闡明,嚴(yán)峻遵循規(guī)則操作,必能得出的成果.
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