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技術(shù)文章

實(shí)驗(yàn)中我們敘述一些ELISA的小技巧

閱讀:379發(fā)布時(shí)間:2020-1-7

科研實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)略,其實(shí)不然。記住從前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA試驗(yàn),跟我說(shuō),ELISA試驗(yàn)幾乎太簡(jiǎn)略了,到第2次在次做ELISA試驗(yàn)的時(shí)分,他驚訝了,說(shuō)效果差別怎樣這么大(同一份標(biāo)本),第三次的時(shí)分,他決議細(xì)心的做一次,爭(zhēng)奪做到同一份標(biāo)本,ELISA試劑盒這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)略,發(fā)覺(jué)其實(shí)挺難的。今日的文章中為我們敘述一些ELISA試驗(yàn)中的小技巧,期望對(duì)我們有所幫助!

1. 顯色液量不可過(guò)多加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色體系后要避光反應(yīng),顯色液量不能過(guò)多,避免顯色過(guò)強(qiáng)。
2. 操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。

3. 要確保加液量一致ELISA試劑盒我們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,構(gòu)成顯色不統(tǒng)一,判別差錯(cuò)。
4. 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說(shuō)明書引薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)停留的時(shí)刻不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流,ELISA試劑盒構(gòu)成孔問(wèn)污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
5. 正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說(shuō)明書一致,否則可導(dǎo)致效果差錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。
ELISA試劑盒的影響要素應(yīng)選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖廉價(jià),忽視質(zhì)量確保。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜交叉運(yùn)用。試劑打開后要在一周內(nèi)用完,剩下的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將構(gòu)成悉數(shù)顯色,導(dǎo)致差錯(cuò)效果。


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