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上海通蔚生物有限公司
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閱讀:350發(fā)布時間:2020-11-3
細胞培養(yǎng)的相關(guān)技術(shù)elisa試劑盒
細胞的復(fù)蘇
【概述】
復(fù)蘇細胞要求快速融化的手段,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化。避免
由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損害。elisa試劑盒
【用品】
培養(yǎng)液、吸管、離心管、培養(yǎng)瓶
【步驟】
[1] 打開水浴鍋,將溫度調(diào)至 37 ℃;
[2] 從液氮中取出凍存的細胞株,用鑷子夾住凍存管(戴防護面罩),迅速置入 37 ℃的
水浴鍋中,不斷振搖凍存管,使之盡快融化,要在 1-2 min 內(nèi)完成復(fù)溫;
[3] *融化后,取出凍存管,移至超凈工作臺,用 75%酒精擦洗消毒,用無菌吸管吸取
細胞懸液移至無菌離心管,加 10 倍的含 10%胎牛血清的培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹勻;
[4] 細胞懸液離心,1000rpm,5-8min,小心棄上清液。加入適量含 10%胎牛血清的培養(yǎng)
液,接種于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃、5% CO2、飽和濕度孵箱中培養(yǎng);elisa試劑盒
[5] 次日更換培養(yǎng)基,以后按常規(guī)培養(yǎng)方法進行培養(yǎng)。如果復(fù)蘇時細胞密度較高及時傳代。
細胞復(fù)蘇時細胞密度以 5×105 個/ml。
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