肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究
摘要：一部分肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用目的通過建立大鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型,觀察模型在缺血再灌注期間血流動(dòng)為學(xué)改變、心臟收縮與舒張功能改變、血清心肌生物學(xué)標(biāo)志物及心肌梗死面積等指標(biāo),探索肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理對(duì)心肌缺血再灌注損傷的協(xié)同保護(hù)作用效果。方法成年SD大鼠50只,建立急性大鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型(缺血30 min,再灌注2 h)。隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CON組)、缺血再灌注組(I/R組)、肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理組(RIPC組)、elisa試劑盒*后處理組(SPC組)和肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理聯(lián)合應(yīng)用組(RIPC+SPC組)。采用Powerlab數(shù)據(jù)采集分析系統(tǒng)監(jiān)測(cè)血流動(dòng)力學(xué)(HR、MAP和RPP),心律失常情況并進(jìn)行評(píng)分及心功能指標(biāo)(LVSP、LVDEP、+dp/dtmax、-dp/dtmax),采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)心肌生物學(xué)指標(biāo)(hs-cTnT、cTnT、CK-MB)血清濃度,采用三苯四氮唑(TTC)染色法測(cè)定心肌梗死范圍。結(jié)果與I/R組比較,RIPC組、SPC組和RIPC+SPC組的血流動(dòng)力學(xué)(HR、MAP和RPP)更加穩(wěn)定,心律失常發(fā)生率及評(píng)分明顯降低,心臟收縮與舒張功能明顯增強(qiáng),血清hs-cTnT、cTnT、CK-MB濃度明顯降低,心肌梗死面積顯著縮小,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與RIPC組或SPC組比較,RIPC+SPC組血流動(dòng)力學(xué)(HR、MAP和RPP)進(jìn)一步穩(wěn)定,心律失常發(fā)生率及評(píng)分進(jìn)一步降低,心臟收縮與舒張功能進(jìn)一步增強(qiáng),血清hs-cTnT、cTnT、CK-MB濃度進(jìn)一步降低,心肌梗死面積進(jìn)一步縮小,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論采用大鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型,聯(lián)合應(yīng)用肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理,可獲得協(xié)同性的心肌保護(hù)作用,血流動(dòng)力學(xué)更加穩(wěn)定,心律失常明顯減少、心功能明顯改善。第二部分肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制目的通過建立大鼠在體心肌缺血再灌注損傷模型,探索肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理通過炎癥信號(hào)通路和凋亡途徑參與對(duì)心肌保護(hù)的作用機(jī)制。方法成年SD大鼠50只,建立急性大鼠在體心肌I/R損傷模型。隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CON組)、缺血再灌注組(I/R組)、肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理組(RIPC組)、*后處理組(SPC組)和肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理聯(lián)合應(yīng)用組(RIPC+SPC組)肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理聯(lián)合應(yīng)用組(RIPC+SPC組)。采用H&E染色檢測(cè)心肌組織病理學(xué)改變;采用ELISA方法檢測(cè)血清炎癥細(xì)胞因子(IL-8,IL-6和TNF-α)含量;采用qRT-PCR檢測(cè)TLR4/MyD88/NF-κB(p65)炎癥通路;通過TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞Bcl-2/Caspase-3/PARP調(diào)亡途徑。結(jié)果與I/R組比較,RIPC組、SPC組和RIPC+SPC組的心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)明顯減輕;炎性細(xì)胞因子(IL-6、IL-8和TNF-α)表達(dá)顯著下降;炎性介質(zhì)(MyD88、NF-κB(p65))的mRNA表達(dá)明顯下調(diào),而抗炎因子IKB-α表達(dá)上調(diào)。抑/促凋亡基因(Bcl-2/Bax)比值顯著升高,C-Caspase-3蛋白表達(dá)顯著降低,而PARP蛋白表達(dá)明顯提高。與RIPC組或SPC組比較,RIPC+SPC組心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)進(jìn)一步減輕;炎性細(xì)胞因子(IL-6、IL-8和TNF-α)表達(dá)進(jìn)一步下降;炎性介質(zhì)(MyD88、NF-κB(p65))的mRNA表達(dá)進(jìn)一步下調(diào),而抗炎因子IKB-α表達(dá)進(jìn)一步上調(diào)。抑/促凋亡基因(Bcl-2/Bax)比值進(jìn)一步升高,C-Caspase-3蛋白表達(dá)進(jìn)一步降低,而PARP蛋白表達(dá)進(jìn)一步提高。結(jié)論1、肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理的聯(lián)合應(yīng)用,可顯著抑制心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)和調(diào)亡,減輕心肌組織炎癥和細(xì)胞凋亡,心肌組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)明顯改善。elisa試劑盒2、肢體遠(yuǎn)隔缺血預(yù)處理和*后處理通過TLR4/MyD88/NF-κB(p65)炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路減輕心肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)和通過Bcl-2/Caspase-3/PARP凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路減少心肌細(xì)胞凋亡,共同減輕心肌缺血再灌注損傷,從而保護(hù)心肌組織。
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