詳情: 1、原理及適用范圍
(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產(chǎn)生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。測試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專一性的酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認是否原菌的存在,大大地簡化了檢測程序。本產(chǎn)品適用于各類生、熟食制品,飲料,糕點類,調味品,奶制品等的快速檢測。執(zhí)行標準:食品安全國家標準食品微生物檢驗黃色葡萄球菌檢驗(GB 4789.10)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的取樣罐或均質杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,調節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將測試片(BT206)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。 2.3、培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結果判讀 培養(yǎng)后,測試片上紫紅色的菌落為;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本,用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、計數(shù)原則及報告方式 4.1、選擇菌落數(shù)在20~200個之間的紙片進行計數(shù)。 4.2、若兩個稀釋度的菌落數(shù)均在20~200之間,則取其平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為每毫升(或每克)樣品中數(shù)。 4.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數(shù)都小于20,則計數(shù)稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之;如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數(shù)報告之。 4.4、如果所有稀釋度的菌落數(shù)都大于200,計數(shù)稀釋度的測試片上的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。計數(shù)菌落數(shù)大于200的測試片時,也可計數(shù)一個或兩個具有代表性的方格內(nèi)的菌落數(shù),換算成單個方格內(nèi)的菌落數(shù)后乘以20(濾紙區(qū)面積為20cm2),即為測試片上估算的菌落數(shù)。報告單位以CFU/mL(或CFU/g)表示。 5、附加說明 5.1、本產(chǎn)品對于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門應對細菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明,當在0~9個菌落范圍內(nèi)時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為檢驗應用。 5.3、經(jīng)試驗,該測試片的檢測靈敏度高,特異性強,重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu/mL,與營養(yǎng)瓊脂計數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計數(shù)和顯色培養(yǎng)基計數(shù)比較,檢測結果均無顯著差異。(食品研究與開發(fā)2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。 6、保存條件 本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。
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