詳情: 1、原理及適用范圍 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌,海產品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據國家食源性疾病監(jiān)測網統(tǒng)計,我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢,已成為我國一個嚴重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為:上腹部疼痛、腹瀉、、嘔吐、發(fā)熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續(xù)1~2天。
副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24h就可確認是否原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗部門和食品生產加工企業(yè)使用。 本產品適用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測。 參照標準:食品衛(wèi)生微生物學檢驗副溶血性弧菌檢驗(GB/T 4789.7-2008)。
2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固。每個樣品接種兩片,同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內,堆疊片數不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結果判讀 呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數非目的菌在測試片上不生長,少數能生長,如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍色,明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本,用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、報告方式 在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。
5、附加說明 5.1、根據技術中心所做的對比試驗結果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性,對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL,與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準(SN)方法符合率達到90%以上(中國衛(wèi)生檢驗雜志2008,18(12):2621-2623)。 5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
6、保存條件 本產品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。
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