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木質(zhì)素( Lignin)含量試劑盒(乙酰化法)
木質(zhì)素( Lignin)含量試劑盒(乙?;ǎ?  src=
參考價(jià)620
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更新時(shí)間:2024-06-19 10:17:13瀏覽次數(shù):442

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【簡(jiǎn)單介紹】
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木質(zhì)素( Lignin)含量試劑盒(乙酰化法)
木質(zhì)素是一種含有羥基和甲氧基的高分子芳香族化合物,是苯丙烷的衍生物,作為植物 的化學(xué)成分與纖維素及半纖維素共同形成植物體骨架

木質(zhì)素( Lignin)含量試劑盒(乙?;ǎ?/strong>

木質(zhì)素( Lignin)含量試劑盒(乙?;ǎ?/strong>

本試劑盒僅供科研使用 1 木質(zhì)素含量測(cè)定說(shuō)明書(shū) (貨號(hào):WS7170F 紫外法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 木質(zhì)素是一種含有羥基和甲氧基的高分子芳香族化合物,是苯丙烷的衍生物,作為植物 的化學(xué)成分與纖維素及半纖維素共同形成植物體骨架,大大提高了細(xì)胞壁的機(jī)械強(qiáng)度,為 植物提供支持,適應(yīng)環(huán)境,抗蟲(chóng)病害和抗倒伏的生理功能,同時(shí),在木質(zhì)素合成過(guò)程中產(chǎn) 生的一些前體物質(zhì)酚類(lèi)和自由基可以破壞原菌相關(guān)酶類(lèi)的生物活性與細(xì)胞膜的通透性,從 而使植物有一定的自我防御能力。 本試劑盒采用乙酰化法,使木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?;?,其在280nm處有特征吸收峰, 280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱(chēng) 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 40mL×1 4℃保存 該試劑具有強(qiáng)揮發(fā)性和一定 的毒性,注意在通風(fēng)櫥操作 并且每次用完需密封保存。 試劑二 液體 20mL×1 4℃保存 三、所需的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、乙酸四、木質(zhì)素含量的測(cè)定: 1、樣本制備: ① 取適量組織樣本烘干并磨碎,過(guò) 40 目篩備用;取 2mg 過(guò)篩的粉末組織,加 1.5mL 80%乙醇,渦旋振蕩混勻,50℃水浴 20min(間隔 3min 晃動(dòng)幾下),取出流水冷 卻后,12000rpm,25℃10min,棄上清,留沉淀(盡量保留沉淀)。 ② 向沉淀中加入 1mL 80%乙醇震蕩混勻 2min,50℃水浴 20min(間隔 3min 晃動(dòng)幾 下),取出流水冷卻后,12000rpm,25℃10min,棄上清,留沉淀(盡量保留沉淀), 95℃烘干沉淀,待用。 2、上機(jī)檢測(cè): ① 紫外分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min,設(shè)置溫度在 25oC,設(shè)定波長(zhǎng)到 280nm,蒸餾水調(diào)零。 ② 選用螺旋蓋式 2mL EP 管,按照下表加樣: 試劑(μL測(cè)定管 空白管 樣本制備得到的沉淀 試劑一 沿管壁緩緩加入750 750 混勻,70℃水浴 30min管口用封口膜封緊或者用重物壓實(shí)),隔 15min 輕輕震蕩一次,結(jié)束后自然冷卻至室溫。 整個(gè)操作過(guò)程,謹(jǐn)慎操作,注意防護(hù)試劑二 沿管壁緩緩加入300 300 乙酸 450 450本試劑盒僅供科研使用 2 【注】1.若是木本植物也可考慮添加高氯酸進(jìn)行乙酰化,即樣本制備得到的沉淀+750μL 試劑一+30μL 高氯酸(也需緩慢加入,謹(jǐn)慎操作),充分混勻,70℃水浴 30min (整個(gè)操作過(guò)程同上),加 300μL 試劑二和 420μL 乙酸,總體積仍為 1.5mL, 后續(xù)操作過(guò)程同上。 2.A 測(cè)定管大于 1.8,在最后一步用比色皿檢測(cè)時(shí):取 80μL 澄清上清 +720μL 乙酸至 1mL 石英比色皿(光徑 1cm)中(空白管也一樣操作),則 上清液相當(dāng)于稀釋了 10 倍,則計(jì)算公式中的 10 替代 4 參與計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算: 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程:y = 17.853x - 0.0029;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y ΔA。 2、按樣本重量計(jì)算: 木質(zhì)素(mg/g 重量)=[(ΔA+0.0029)÷17.853]×V1÷W×4 =0.084×(ΔA+0.0029)÷W×4 V1---定容后總體積,1.5mL4---至比色皿中檢測(cè)時(shí)上清液稀釋倍數(shù); W---樣本重量,1.5mg=1.5×10-3g。 振蕩充分混勻,總體積為 1.5mL(即為待檢混合液)。 注:由于冰乙酸易揮發(fā),請(qǐng)混勻后立即測(cè)定! 室溫下 5000rpm 離心 5min,取 200μL 澄清上清液于 1mL 石英比色皿 (光徑 1cm)中,再加 600μL 乙酸至石英比色皿中,于 280nm 下讀 取吸光值 AΔA=A 測(cè)定管-A 空白管。 注:由于冰乙酸易揮發(fā),可每次測(cè)定 1 個(gè)樣本。



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