目的
1．學(xué)習(xí)并掌握細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的特點(diǎn)及其測(cè)定的原理，從而了解微生物在一定條件下生長(zhǎng)、
繁殖的規(guī)律。
2．學(xué)習(xí)并掌握由生長(zhǎng)曲線計(jì)算微生物代時(shí)的方法。
原理
生長(zhǎng)曲線就是將一定量的單細(xì)胞微生物接種在適合的新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜溫度條件下進(jìn)行培養(yǎng)，然后以菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，以生長(zhǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，得到的曲線即是，如圖20-1 所示。生長(zhǎng)曲線一般分為延遲期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個(gè)時(shí)期。不同的微生物具有不同的生長(zhǎng)曲線，同一微生物在不同條件下培養(yǎng)也會(huì)得到不同的生長(zhǎng)曲線。生長(zhǎng)曲線的測(cè)定包括血球計(jì)數(shù)法、平板菌落計(jì)數(shù)法、稱重法及比濁法等多種。本實(shí)驗(yàn)采用比濁法測(cè)定。因?yàn)榧?xì)菌懸液的濃度與渾濁度成正比，所以可利用光電比色計(jì)測(cè)定菌懸液的光密度來推知菌液的濃度，并將所測(cè)得的光密度值（OD 值）與其對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長(zhǎng)曲線（本試驗(yàn)采用半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙繪圖）。在曲線上對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期范圍內(nèi)，任取兩個(gè)成倍的OD 值，其相對(duì)應(yīng)的時(shí)間差即為該菌代時(shí)G。
材料
1．菌種：大腸桿菌（Escherichia coli）
2．培養(yǎng)基：250ml 三角瓶分裝100ml，18×180mm 試管分裝5ml LB 培養(yǎng)液。
3．滅菌物品：18×180mm 試管，10ml 吸管。
4．儀器：722 分光光度計(jì)，恒溫?fù)u床。
5．其它：廢液缸，擦鏡紙，吸水紙，蒸餾水。
方法
1．種子液的培養(yǎng)：將大腸桿菌接入LB 培養(yǎng)液試管過夜培養(yǎng)至OD600 值為1。
2．接種：以無菌操作方式向100ml LB 培養(yǎng)液中加入10ml OD600 值為1 的大腸桿菌菌懸液，此時(shí)培養(yǎng)液OD600 值為0.1，并記錄為“0”時(shí)。
3．培養(yǎng)與測(cè)定：將接種后的培養(yǎng)液置于37℃下振蕩培養(yǎng)，定時(shí)取樣，每次均取5ml，然后以無菌培養(yǎng)液為對(duì)照，在722 光柵分光光度計(jì)上，測(cè)定OD600 值，并記錄。
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