好看日韩在线视频免费,日本不卡一区二区三区,三级a全过程在线观看,亚洲精品国产9999久久久久

產(chǎn)品規(guī)格：1*10^6個細胞/T25
凍存條件:無血清細胞凍存液
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。
溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
傳代方法 1:2~1:4傳代
傳代情況： 2天換液
PC-9/GR人肺腺癌細胞吉非替尼耐藥株描述：收集瓶子中培養(yǎng)基留作過渡培養(yǎng)細胞鋪板是細胞實驗中常見又必須掌握的一門技術，看似簡單，然而卻經(jīng)常遇到如細胞居中或者中間稀疏等不均勻分布的現(xiàn)象，結果就是只能整板扔掉，重新鋪板，既耽擱時間又浪費了細胞及培養(yǎng)板等資源。歷經(jīng)多次失敗后，你才會發(fā)現(xiàn)，原來細胞鋪板是有規(guī)律可循的，今天我們就聊一聊：細胞鋪板的3種手法。

首先，我們來看看細胞鋪板不均勻的3種常見情況：

1，中間多，周圍少

2，中間少，四周多

3，呈現(xiàn)一坨一坨的狀態(tài)

這么多種不均勻的情況，到底該怎么拯救呢？一起來看看細胞鋪板的三種手法：
手法一：均勻單層

要鋪成那種很均勻的單層細胞，手法如下：

1，細胞板子先加入一定量(一般是總量培養(yǎng)基的1/5)的培養(yǎng)基，放入孵箱中放置10-20min。

2，在滴入細胞時，細胞板子與通風櫥有一定的角度，沿著板壁的孔邊緣滴入。

3，滴入后，呈“8”字方法搖晃5-8次。

4，置于水平臺上，放置10-20分鐘

5，放入孵箱。
在細胞鋪板時，每一種板子的孔面積有多大，培養(yǎng)的液體量以及加入細胞量如下：

手法二：中間少，周圍多
其實細胞鋪板不一定都需要單個單個的那么均勻，比如，做免疫熒光時，學霸姐姐喜歡鋪中間少，周圍稍多的板子，

因為這個樣子可以同時檢測到單個細胞的形態(tài)，另外又可以照一點低倍的用作于統(tǒng)計，所有的細胞都在一個環(huán)境中。

特別說明一下：這里的多也只是相對于多，細胞也是單層的。

中間

周圍

要鋪這樣的細胞樣子，那鋪細胞時要注意手法了：
1，細胞板子不需要提前用培養(yǎng)基潤洗，直接從邊上滴入混有細胞的培養(yǎng)基。

2，放置30s-1min后，前后搖晃5-8次。

3，放在水平臺上靜置2-5min。

4，放入孵箱。

手法三：中間多，周圍少

學一般在提取蛋白或者提取RNA的時候，可以這樣鋪板，因為有些細胞刮刀不好用，沒有辦法刮到周圍的。想要鋪中間多，周圍少的板子，手法如下：

1，細胞板子不需要提前潤洗，從中間滴入進去后。

2，把板子朝一個方向順時針或者逆時針旋轉3-5圈。

3，水平臺上靜置2-5min。

4，放入孵箱。

總結一下：想要細胞鋪板鋪得好，背景知識很重要
其實在鋪細胞的時候，你要準確的知道你所養(yǎng)的細胞的特性，比如：

1，細胞的名稱，來源。

2，細胞的屬性。

3，細胞分裂時間。
還有，主要的是要搞清楚你的細胞的生長曲線，還要知道鋪板后多久可以到達什么細胞密度。

如果你準確的掌握了你的細胞特性，那鋪板是分分鐘搞定的事情。

細胞鋪板后，細胞狀態(tài)不好怎么辦？

如果出現(xiàn)這種情況，學霸姐姐建議你從以下幾個方面考慮一下原因：

1，用來鋪板的細胞狀態(tài)本身就不好。

2，用來鋪板的細胞傳代次數(shù)太多，有些老化。

3，胰酶消化時間過長。

4，中和的血清量及時間不夠。

5，支原體污染。
PC-9/GR人肺腺癌細胞吉非替尼耐藥株鋪板是一個經(jīng)驗積累的過程，你的手法也需要積極的改進，不要生搬硬套，也不要一味追求的鋪均勻，在實驗過程中多思考細胞本身的特征和屬性，出現(xiàn)問題積極解決即可。

相關產(chǎn)品如下：

HEL 人紅白細胞白血病細胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮 淋巴母細胞 是 
T24 人膀胱移行細胞癌細胞 McCoy’s 5A+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞源自一位81歲白人女性患者的膀胱移行細胞癌組織；來源于移行細胞癌病人的白血病和血漿對T24和相關細胞株有細胞毒性；倍增時間為19小時；含ras(H-ras)癌基因,表達腫瘤*抗原。
HuH-7 人肝癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 此細胞產(chǎn)甲胎蛋白，胰酶α抗體，血漿銅藍蛋白，纖維蛋白原，纖維粘連蛋白等。
Hacat 人永生化角質形成細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
MRC-5 人胚肺成纖維細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 成纖維細胞樣 是 MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細胞老化前能傳代42到46次群體倍增。 它是正常二倍體細胞系，46，XY核型。 模式染色體數(shù)為46，概率為70%。
95-D 人高轉移肺癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 這是一株高轉移肺癌。
AsPC-1 人轉移胰腺腺癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞來源于人胰腺癌裸鼠異種移植產(chǎn)生的癌性腹水，可以表達CEA，人胰腺相關抗原、人胰腺特異性抗原和黏蛋白。
A-431 人表皮癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的85歲女性，是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克??；是一個超三倍體人細胞株。
A2780 人卵巢癌細胞 1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 從一位未接受治療的患者的癌組織中分離建系。細胞會單層生長，在搖床培養(yǎng)時可懸浮生長?？捎米骺顾幩幬锩舾行匝芯磕Ｐ汀?br />HCT-116 人結直腸腺癌細胞 McCoy’s 5A+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣  HCT116是1979年Brattain M等從患結腸癌的男性病人中分離建立的3株惡性細胞之一；產(chǎn)生CEA、角蛋白。在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。
CCRF-CEM 人急性淋巴白血病細胞 RPMI-1640+10% FBS 懸浮 淋巴母細胞 是 G.E. Foley 等人建立了類淋巴母細胞細胞株CCRF-CEM。 細胞是1964年11月從一位四歲白人女性急性淋巴細胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。此細胞系從香港收集而來。
HEB 人腦星型膠質正常細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 成纖維細胞樣  
WPMY-1 人正常前列腺基質永生化細胞 DMEM+5%FBS 貼壁 成纖維細胞樣  肌成纖維基質細胞株, WPMY-1, 與RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609)一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質細胞。 通過一個pRSTV質料結構，用SV40大T抗原對基質細胞進行永生化。 WPMY-1細胞，與RWPE-1細胞及其它上皮細胞衍生株一樣，屬于來源于同一個前列腺的一系列細胞株。 由于它們來源于同一個前列腺的周圍區(qū)域，WPMY-1細胞株對于研究分泌和基質與上皮細胞相互作用尤其有用。 據(jù)提供者報道，來源于同一個前列腺的RWPE-1細胞株(ATCC CRL-1)。
SW620 人結腸癌細胞 L15+10%FBS  貼壁 上皮細胞樣 是 SW620是從一個51歲男性白人組織中分離得到。 由A.Leibovitz等從一個淋巴結建株。 細胞系主要由無絨毛的小園球細胞和雙極細胞組成。 它僅合成少量癌胚抗原（CEA）且在裸鼠中有高度的致瘤性。
NCI-H520 人肺鱗癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 1982年Gazdar AF等建系，源于鱗狀細胞肺癌組織；該細胞p53 mRNA表達水平較正常肺組織低，但是沒有大的結構DNA的異常。角蛋白、波形蛋白陽性，神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性；該細胞在軟瓊脂中可形成克隆。
5637 人膀胱癌細胞 RPMI-1640 + 10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞源于一位68歲的患有膀胱癌的白人男性患者。據(jù)報道，該細胞能產(chǎn)生 SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。
293(HEK-293) 人胚腎細胞 DMEM + 10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 早期報道中指出該細胞基因組中含有腺病毒5（Ad5）基因組的左側端和右側端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1～4344位線性核苷酸整合入細胞染色體19q13.2。該細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主。可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級別為2級。
BT-B 人膀胱癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 
LS 174T 人結腸腺癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣  該細胞是LS 180結腸腺癌細胞株的胰蛋白酶化變種。它比親本更易傳代，像LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。電鏡研究表明，它有豐富的微絲和胞漿黏液素液泡；血清學檢測直腸抗原3陽性；p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性；角蛋白陽性；癌基因c-myc、N-myc、H-ras、N-ras、Myb和fos的表達呈陽性；癌基因k-ras和sis的表達未做檢測；可產(chǎn)生IL-10、IL-6和黏蛋白。
AAV-293 腺病毒轉化的人胚腎細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣  我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
Hep 3B(Hep 3B2.1-7) 人肝癌細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 Hep-3b細胞建系于1979年，源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細胞產(chǎn)生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、轉鐵蛋白、補體（C3)、C3活性載體，纖維原等，具有廣泛的研究價值。
BxPC-3 人原位胰腺腺癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞表達黏蛋白、胰腺癌特異抗原和癌胚抗原。裸鼠皮下注射10的7次方細胞，在21天內(nèi)*成瘤。該細胞不表達囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)蛋白（CFTR)。
HT-1080 人纖維肉瘤細胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 該細胞源自一名35歲患有纖維肉瘤的白人男性的結締組織；ras＋。
BT-549 人乳腺導管癌細胞 RPMI-1640+10% FBS+0.023IU/ml Insulin 貼壁 上皮細胞樣 是 BT-549細胞的來源組織是一個狀侵入性導管瘤，7個局部淋巴結中3個已有轉移。由此組織建立的BT-549細胞是多態(tài)性的，包括上皮細胞樣組分和多核巨細胞。
NCI-N87 人胃癌細胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細胞樣 是 NCI-N87細胞表達表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且沒有左旋多巴胺脫羧酶(DDC)活性。 它們的血管活性的腸肽(VIP)受體活性極低并缺乏胃泌激素受體。