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上海雅吉生物科技有限公司

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BJAB人B細胞淋巴瘤細胞
BJAB人B細胞淋巴瘤細胞
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更新時間:2019-05-22 12:53:46瀏覽次數(shù):194

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【簡單介紹】
BJAB人B細胞淋巴瘤細胞是指從機體的組織或器官經(jīng)胰蛋白酶、膠原酶、中性蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體環(huán)境培養(yǎng)的細胞。一般認為,培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè),如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等

原代細胞較接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
  原代細胞的培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng),是從供體取得組織細胞在體外進行的*培養(yǎng),是建立細胞系的*步,是一項基本技術(shù)。

BJAB人B細胞淋巴瘤細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
 ?、?組織塊培養(yǎng)法
  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
 ?、?消化培養(yǎng)法
 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)
  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

BJAB人B細胞淋巴瘤細胞的培養(yǎng)條件:
  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
  4、 胎牛血清濃度為10%-80%;
  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)
  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。



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