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上海雅吉生物科技有限公司

主營產(chǎn)品: 培養(yǎng)原代細胞,細胞系價格,耐藥細胞株,實時熒光pcr試劑盒

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BSC40非洲綠猴腎細胞
BSC40非洲綠猴腎細胞
參考價 85
訂貨量 1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

更新時間:2019-06-06 12:51:09瀏覽次數(shù):201

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【簡單介紹】
BSC40非洲綠猴腎細胞經(jīng)過形態(tài)學(xué)等檢測,保證細胞純度在90%以上;同時也需經(jīng)過微生物檢測。來源于美國ATCC、DSMZ、ECACC、上海生化細胞所、中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會等,經(jīng)過嚴格質(zhì)量控制,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力95%以上,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。免費贈送STR鑒定報告,一切為科研!

BSC40非洲綠猴腎細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞*貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 
4、細胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
BSC40非洲綠猴腎細胞常見問題及解決方法:
1、觀察細胞密度用(4X物鏡)低倍鏡觀察,以便正確的判斷細胞密度;觀察細胞形態(tài)請用(10X 或 20X)高倍鏡觀察;
2、瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng);
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心重懸后接種到新瓶內(nèi);
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液及細胞污染,請及時與我們。
5、培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。
6、細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2 小時后觀察,
7、如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉,留 8-10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度 85-95%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁, 將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我 們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
8、細胞消化鋪板,細胞死亡較多。 *消化時間掌控好切勿消化過度,第二終止要*(以T25瓶為例,加1ml胰酶用5ml*培養(yǎng)基終止),第三控制吹打次數(shù)和力度,避免損傷。
我公司代理銷售ATCC來源,sciencell來源,上海細胞庫來源等細胞銷售,另我公司有自建細胞庫,生產(chǎn)培養(yǎng)各類細胞系,采用灌注法制備各種原代細胞。



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