產(chǎn)品簡(jiǎn)介

異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)，常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。當(dāng)pUC系列的載體DNA（或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性，可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

產(chǎn)品性質(zhì)

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。粉末-20 oC避光保存。

注意事項(xiàng)

1）含有IPTG的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1周內(nèi)使用。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

儲(chǔ)存液配制

1）稱取2.383 g IPTG；加入10 mL去離子水充分溶解IPTG粉末，配制1 M的儲(chǔ)存液；

2）用5-10 mL去離子水潤(rùn)濕0.22 μm針孔過濾；

3）0.22μm濾膜除菌上述IPTG溶液。分裝成1 mL，-20℃凍存，有效期可達(dá)1年。

藍(lán)白斑篩選

1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

1）高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基，并冷卻到50℃左右。

2）每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入10 μL20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其終濃度達(dá)到1 mM）；

3）加入適量抗生素；

4）混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)。

2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面

1）于無(wú)菌超凈工作臺(tái)制備平板（如LB 瓊脂板）；

2）取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上；

【注】：平板邊緣較難充分涂布均勻，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性，因此，為了得到更好結(jié)果，建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

3）37℃ 孵育直至所有液體被吸收（30 min或更長(zhǎng)）。接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)。

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