產(chǎn)品簡(jiǎn)介
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì),常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等。當(dāng)pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文名稱(Chinese Synonym) | 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 |
英文名稱(English Synonym) | Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; |
CAS號(hào)(CAS NO.) | 367-93-1 |
分子式(Molecular Formula) | C9H18O5S |
純度(Purity, HPLC) | ≥98% |
雜質(zhì)(Impurities) | ≤0.1% Dioxane |
外觀(Appearance) | 白色粉末 |
分子量(Molecular Weight) | 238.30 |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。粉末-20 oC避光保存。
注意事項(xiàng)
1)含有IPTG的培養(yǎng)基4℃避光保存,須在1周內(nèi)使用。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
儲(chǔ)存液配制
1)稱取2.383 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解IPTG粉末,配制1 M的儲(chǔ)存液;
2)用5-10 mL去離子水潤(rùn)濕0.22 μm針孔過濾;
3)0.22μm濾膜除菌上述IPTG溶液。分裝成1 mL,-20℃凍存,有效期可達(dá)1年。
藍(lán)白斑篩選
1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液
1)高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到50℃左右。
2)每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入10 μL20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其終濃度達(dá)到1 mM);
3)加入適量抗生素;
4)混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)。
2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面
1)于無菌超凈工作臺(tái)制備平板(如LB 瓊脂板);
2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上;
【注】:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產(chǎn)生假陽性,因此,為了得到更好結(jié)果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。
3)37℃ 孵育直至所有液體被吸收(30 min或更長(zhǎng))。接種細(xì)菌于37℃過夜培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) | 產(chǎn) | 元 | |
M1397 | IPTG | 10g | 419 |
M5831-100mg | X-α-Gal | 100mg | 1280 |
M5831-250mg | X-α-Gal | 250mg | 2199 |
S2705 | MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸 | 250mg | 680 |
S2805 | MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸 | 1g | 1780 |
M0129 | Aureobasidin A(AbA)金擔(dān)子素A (1mg/ml) | 1mg | 1378 |
M0135 | Aureobasidin A (AbA)金擔(dān)子素A(凍干粉) | 10mg | 6800 |
M1405-1g | 硫酸qingdameisuGentamicin Sulfate Salt | 1g | 382 |
M1405-5g | 硫酸qingdameisuGentamicin Sulfate Salt | 5g | 1150 |