汞離子是*的金屬離子，在許多生物過程中都起著重要作用。汞離子被認為是zui危險的污染物和高度危險的材料之一。Hg2 +的高毒性是由于它與生物配體（例如蛋白質，DNA和酶）中的巰基具有高度親和力。當Hg2 +從環(huán)境中吸收到人體后，可能會引起微管，離子通道和線粒體中的畸變，并嚴重損害腎臟，心臟，大腦，胃，腸，中樞神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)。另外，汞通過食物鏈或生態(tài)系統(tǒng)中的大氣累積，并且由于其非生物降解性而具有相對較長的大氣停留時間。由于各種原因，已經(jīng)進行了深入研究，特別是，其環(huán)境影響和生物并發(fā)癥。但是，為快速檢測汞離子而開發(fā)的商業(yè)產品很少。汞的高度選擇性和靈敏檢測具有毒理學和環(huán)境重要性。Amplite™熒光汞離子定量試劑盒提供了一種基于熒光的強大分析方法，可以高選擇性地測量汞離子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身幾乎不發(fā)熒光，但結合Hg2 +離子后會產生500倍以上的熒光增強。熒光信號可以用熒光酶標儀測量。使用該試劑盒，我們能夠在100 µL反應體積中檢測出低至8 µM Hg2 +。為快速檢測汞離子而開發(fā)的商業(yè)產品很少。汞的高度選擇性和靈敏檢測具有毒理學和環(huán)境重要性。Amplite™熒光汞離子定量試劑盒提供了一種基于熒光的強大分析方法，可以高選擇性地測量汞離子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身幾乎不發(fā)熒光，但結合Hg2 +離子后會產生500倍以上的熒光增強。熒光信號可以用熒光酶標儀測量。使用該試劑盒，我們能夠在100 µL反應體積中檢測出低至8 µM Hg2 +。為快速檢測汞離子而開發(fā)的商業(yè)產品很少。汞的高度選擇性和靈敏檢測具有毒理學和環(huán)境重要性。Amplite™熒光汞離子定量試劑盒提供了一種基于熒光的強大分析方法，可以高選擇性地測量汞離子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身幾乎不發(fā)熒光，但結合Hg2 +離子后會產生500倍以上的熒光增強。熒光信號可以用熒光酶標儀測量。使用該試劑盒，我們能夠在100 µL反應體積中檢測出低至8 µM Hg2 +。Amplite™熒光汞離子定量試劑盒提供了一種基于熒光的強大分析方法，可以高選擇性地測量汞離子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身幾乎不發(fā)熒光，但結合Hg2 +離子后會產生500倍以上的熒光增強。熒光信號可以用熒光酶標儀測量。使用該試劑盒，我們能夠在100 µL反應體積中檢測出低至8 µM Hg2 +。Amplite™熒光汞離子定量試劑盒提供了一種基于熒光的強大分析方法，可以高選擇性地測量汞離子（Hg2 +）。Mercury Lite™590本身幾乎不發(fā)熒光，但結合Hg2 +離子后會產生500倍以上的熒光增強。熒光信號可以用熒光酶標儀測量。使用該試劑盒，我們能夠在100 µL反應體積中檢測出低至8 µM Hg2 +。

平臺

組件

1. 準備汞（II）標準品或測試樣品（50 µL）

2. 添加汞工作溶液（50 µL）

3. 在室溫下孵育20-30分鐘

4. 監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm的熒光強度

重要說明
為了獲得*效果，強烈建議使用黑色印版。開始實驗前，請在室溫下解凍試劑盒的組件。

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。避免重復凍融循環(huán)。

1. Mercury Lite™590儲液（200X）：
將25 µL DMSO加入小瓶Mercury Lite™590（組分A）中并充分混合。遠離光線。注意：一次性使用等分試樣，并將未使用的200X Mercury Lite™590儲備溶液存儲在-20oC下，避免光照并重復凍融循環(huán)。

2.汞（II）標準儲備溶液（未提供）：
我們使用汞（II）高氯酸鹽水合物（Sigma 529656，CAS＃304656-34-6）作為汞（II）標準。在ddH ₂ O中以1 mM的濃度制備汞（II）的儲備溶液。

配制標準溶液

為了方便起見，請使用我們的系列稀釋計

使用ddH ₂ O 進行1：2系列稀釋，以得到大約500、250、125、62.5、31.3、15.6和7.8 µM系列稀釋的汞（II）標準品（M7-M1）。

準備工作溶液

將25 µL Mercury Lite™590儲備溶液加入5 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合（組分A + B）。 注意：這種汞工作液足以用于一個96孔板。它不穩(wěn)定，請及時使用。

程序

表1.  黑色96孔微孔板中汞（II）標準品和測試樣品的布局。M =汞（II）標準品（M1-M7，7.8至500 µM），BL =空白對照，TS =測試樣品。

表2.  每個孔的試劑組成。

1. 根據(jù)表1和表2提供的布局，準備并添加汞（II）標準（M），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。對于384孔板，請每孔使用25 µL試劑代替50 µL。
   

2. 將50 µL汞工作溶液添加到汞（II）標準液，空白對照和測試樣品的每個孔中，使總汞測定體積為100 µL /孔。對于384孔板，向每個孔中添加25 µL的汞工作溶液，總體積為50 µL /孔。
   

3. 在避光的條件下，將反應在室溫下孵育20-30分鐘。
   

4. 使用熒光板讀數(shù)器在Ex / Em = 540/590 nm，截止570 nm處監(jiān)視熒光的增加。

數(shù)據(jù)分析

100010010110010- Dose-ResponseData legendGenerated with Quest GraphMercury II (uM)RFUHover mouse to interact

從空白標準孔獲得的讀數(shù)（RFU）用作陰性對照。從其他標準的讀數(shù)中減去該值即可得到基線校正值。然后，繪制標準讀數(shù)，以獲得標準曲線和方程式。該方程式可用于計算水銀II樣品。