胺修飾的脫氧尿苷5'-三磷酸酯（例如氨基烯丙基-dUTP）可用于通過常規(guī)酶促摻入方法（例如逆轉(zhuǎn)錄，缺口翻譯，隨機(jī)引物標(biāo)記或PCR）生產(chǎn)含胺的DNA。氨基烯丙基dUTP可以通過常規(guī)酶結(jié)合技術(shù)輕松地?fù)饺隓NA。然后可以使用任何胺反應(yīng)性熒光染料，shengwusu和其他胺反應(yīng)性試劑對所得的胺修飾的核酸進(jìn)行標(biāo)記。與通常具有較高立體阻礙的標(biāo)簽標(biāo)記的尿苷三磷酸相比，氨基烯丙基修飾的核苷酸可以摻入到*且一致的水平。胺修飾的核酸與過量的胺反應(yīng)試劑的隨后反應(yīng)，無論選擇何種標(biāo)記試劑，都可以實現(xiàn)相應(yīng)較高的一致標(biāo)記效率。這種兩步標(biāo)記方法還消除了優(yōu)化酶促反應(yīng)以適應(yīng)不同染料修飾核苷酸的需要，后者可以以非常不同的速率摻入。這種標(biāo)記方法廣泛用于FISH探針和基于微陣列的實驗。

計算器

普通儲備溶液的制備

表1.在Tris緩沖液（pH 7.5）* * CAS 936327-10-5 *中將AA-dUTP [氨基烯丙基dUTP鈉鹽] * 4 mM的特定質(zhì)量重構(gòu)至給定濃度所需的水量。請注意，該體積僅用于制備儲備溶液。有關(guān)適當(dāng)?shù)膶嶒?生理緩沖液，請參閱樣本實驗方案。