由于高度純化的若丹明110（R110）衍生的底物被鎖定為內(nèi)酯構(gòu)型，因此它們是無(wú)色且無(wú)熒光的。半胱天冬酶對(duì)R110肽的切割產(chǎn)生強(qiáng)熒光的R110，可以在510-530 nm處用488 nm的激發(fā)進(jìn)行熒光檢測(cè)，這是熒光儀器中zui常用的激發(fā)光源。R110衍生的caspase底物可能是zui敏感的指示劑，廣泛用于熒光檢測(cè)各種caspase活性。該R110底物專門針對(duì)半胱天冬酶3和7。我們基于R110的底物經(jīng)過(guò)高度純化，以消除痕量的游離R110，這是HPLC無(wú)法檢測(cè)到的，但會(huì)導(dǎo)致顯著的測(cè)定背景。

重要說(shuō)明重要的
是要存放在<-15°C下，并且應(yīng)該存放在陰涼處。

自收到之日起12個(gè)月內(nèi)可以使用。 

儲(chǔ)備溶液的制備

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

1.（Z-DEVD）₂ -R110儲(chǔ)備溶液（10 mM）：
將65 µL DMSO加入1 mg（Z-DEVD）₂ -R110的小瓶中制成10 mM儲(chǔ)備溶液。

準(zhǔn)備工作溶液

半胱天冬酶3/7分析溶液（2X）：
混合50 µL（Z-DEVD）₂ -R110儲(chǔ)備液（10 mM），100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM）和10 mL Tris Buffer（20 mM） ），pH = 7.4。

程序

1. 將等體積的caspase 3/7標(biāo)準(zhǔn)品或樣品與2X caspase 3/7分析反應(yīng)溶液混合，并在室溫下孵育至少1小時(shí)。
    
2. 在Ex / Em = 490/525 nm處監(jiān)測(cè)熒光的增加。

   13431	Caspase 8熒光底物(Ac-IETD)2-R110 綠	(Ac-IETD)2-R110	1 mg
   13433	Caspase 3/7熒光底物 Z-DEVD-ProRed™ 620 紅	Z-DEVD-ProRed™ 620	1 mg