產(chǎn)品應(yīng)用：

免疫化學(xué)法檢測細(xì)胞和組織缺氧情況，包括免疫熒光（IF），免疫過氧化物酶，WB或流式細(xì)胞分析（FC）；

試劑盒組分：

編號 組分名稱 貨號（規(guī)格） 保存方法

HP1-100Kit HP1-200Kit HP1-1000Kit

1 Pimonidazole HCl 100mg 200mg 1000mg 室溫或2-8℃避光

2 4.3.11.3 mouse MAb 1ml 1ml 1ml -20℃，避免反復(fù)凍融 

試劑盒組分詳細(xì)描述：

Hypoxyprobe-1

Hypoxyprobe-1 是2-硝基咪唑的替代物，其化學(xué)名和*成分是Pimonidazole hydrochloride（Pimonidazole HCl），分子量為290.8，水溶性為400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系數(shù)為7020（0.9%生理鹽水）。

Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化學(xué)穩(wěn)定性。比如，固體形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光線下室溫保存2年，UV和HPLC分析法評估無任何降解發(fā)生。溶于0.9%生理鹽水的Hypoxyprobe-1，濃度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法評估無任何降解發(fā)生。

作用機(jī)理：缺氧細(xì)胞中Pimonidazole被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸中的巰基基團(tuán)（thiol groups）形成穩(wěn)定的加合物。Mab1抗體結(jié)合這些加合物從而能借由免疫化學(xué)法來檢測。

MAb1抗體

MAb1是小鼠IgG1單克隆抗體（克隆4.3.11.3），為雜交瘤細(xì)胞克隆4.3.11.3表達(dá)液過濾除菌后得到的上清液，含60μg/ml MAb1和0.15%疊氮鈉。

感興趣組織可用免疫組化檢測（IHC），冰凍切片或者福爾馬林固定的石蠟包埋切片；也可組織降解后用流式分析法檢測；或用WB檢測。典型情況下，MAb1抗體經(jīng)1:50稀釋后，取100μl到組織切片上。然后加合適的二抗方法來檢測Pimonidazole加合物。

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