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1.1.1儀器
kou罩細菌過濾效率(BFE)檢測儀、高壓蒸汽滅菌器、電子天平、生化培養(yǎng)箱、超凈工作臺、菌落計數(shù)儀。
1.1.2試劑及材料
蒸餾水、75%消毒酒精、*大豆瓊脂(TSA)、胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)、蛋白胨、酒精燈、90mm培養(yǎng)皿、500mL錐形瓶。
細菌懸浮液制備
培養(yǎng)基配置
取500mL錐形瓶,按照要求精確稱取一定量的TSA培養(yǎng)基,加入合適比例的蒸餾水,包扎后放入高壓蒸汽滅菌器,121°C滅菌15min,滅菌結束后取出,待其冷卻至約50°C時,將培養(yǎng)基逐個倒入無菌培養(yǎng)皿中,操作應在超凈工作臺中進行,以酒精燈的火焰周圍作為無菌區(qū)域,避免雜菌污染,每個培養(yǎng)皿中應倒入約27mL培養(yǎng)基。
無菌確認
待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將其倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中,37°C條件下培養(yǎng)24h,將有菌落生長的培養(yǎng)皿舍棄不用,無雜菌生長的取出備用。
細菌懸浮液制備
挑取一環(huán)*ATCC6538接種在適量胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基中,在(37±2)°C振蕩培養(yǎng)(24±2)h,然后用1.5%的蛋白胨將上述培養(yǎng)物稀釋至約5×105cfu/ml。
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