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伊萊博生物科技(上海)有限公司

主營產(chǎn)品: 動物行為學檢測,大中小型動物實驗,細胞培養(yǎng)服務(wù)

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細胞線粒體膜電位檢測
細胞線粒體膜電位檢測
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更新時間:2024-07-26 09:27:08瀏覽次數(shù):1429

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【簡單介紹】
細胞線粒體膜電位檢測(Mitochondrial membrane potential,MMP,ΔΨm)檢測是評估線粒體功能的重要指標之一。線粒體是動植物細胞生成ATP的主要地點,是促進細胞能量轉(zhuǎn)換、參與細胞凋亡的重要細胞器。線粒體在呼吸氧化過程中,將所產(chǎn)生的能量以電化學勢能儲存于線粒體內(nèi)膜,形成線粒體膜電位。

細胞線粒體膜電位檢測


實驗原理

細胞線粒體膜電位檢測JC-1)是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內(nèi)以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發(fā)射峰。當JC-1 濃度低或膜電位水平低時,主要以單體形式存在,激發(fā)波長為527nm,呈綠色熒光;當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時,形成聚合物,發(fā)出紅色的熒光,激發(fā)波長為590nm。當細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。

實驗流程

1. 細胞培養(yǎng);

2. 用適當?shù)姆椒ㄕT導細胞凋亡,同時設(shè)立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞;

3. 用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;

4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL**去離子水稀釋成1×Incubation Buffer,混勻并預熱至37℃;

5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer,加入1μL JC-1,渦旋混勻配成JC-1工作液;

6. 取500 μL JC-1工作液將細胞均勻懸浮,37℃,5% CO2的培養(yǎng)箱中孵育15~20min。

7. 室溫離心(2000rpm,5min)收集細胞,用1×Incubation Buffer洗兩次;

8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細胞;

9. 流式細胞儀檢測,分析。

客戶提供

細胞株(凍存株或培養(yǎng)好的細胞),相關(guān)藥品或MMP檢測試劑盒(可代購)

公司提供

實驗步驟、結(jié)果圖、數(shù)據(jù)結(jié)果和分析報告

實驗周期:1-2周,具體需要根據(jù)細胞生長情況及實驗內(nèi)容而定。

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團隊主要來自大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構(gòu),能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。




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